Invitrogen™ pcDNA™3.2/GW/D-TOPO™ Expression Kit

Beschreibung

• Zytomegalovirus (CMV)-Promotor für hochstufige Expression
• Angepasst für die direktionale TOPO Klonierung, ermöglicht die Verwendung von Proofreading-Polymerasen und das Klonen von PCR-Produkten in einer bestimmten Ausrichtung
• Neomycin-Resistenzgen für eine stabile Selektion
• C-terminales V5-Tag für einfachen Nachweis
• Ampicillin-Resistenzgen und pUC-Ursprung für Selektion und Erhaltung in E. coli
• Klonierung mit TOPO: Die Verwendung von Restriktionsenzymen zum Klonen von Genen in einen Expressionsvektor führt oft zwangsläufig zu einer Beeinträchtigung der finalen Insertionssequenz, besonders dann, wenn in der Nähe der codierenden Sequenz der Gene keine brauchbaren Restriktionsstellen vorhanden sind. Dies kann zu einem nicht optimalen Abstand von Expressionselementen oder zur Aufnahme nicht-nativer Aminosäurereste führen, wodurch Expressionswerte reduziert und/oder nicht-funktionelle Proteine erzeugt werden.
• TOPO Cloning bietet nicht nur eine effektivere Methode der Klonierung, sondern beseitigt auch solche potenziellen Expressionsprobleme
• TOPO-Expressionsvektoren ermöglichen das exakte Einfügen der benötigten DNA-Sequenzen durch einfache PCR mit den entsprechend konzipierten Primern
• Das PCR-Produkt wird mit hoher Effizienz innerhalb von fünf Minuten in einen Topoisomerase I-aktivierten Expressionsvektor geklont
• Der resultierende rekombinante Expressionsvektor enthält eine exakte DNA-Sequenz ohne nicht-kodierende Bereiche

Klonierung, konstitutive Expression, Gateway Klonierung, Säugetierexpression, Proteinexpression, Proteine, Expression, Isolierung und Analyse