Eines der am häufigsten verwendeten Werkzeuge in einem typischen Labor ist die Luftverdränger- oder Luftpolsterpipette. Sie ist praktisch und einfach zu handhaben und kann mit Einwegspitzen ausgestattet werden, um das Risiko einer Kreuzkontamination zwischen Proben zu minimieren.
Wissen Sie, wie Sie die korrekt dimensionierte Pipette für maximale Genauigkeit auswählen? Schauen wir uns zuerst die Mechanik an.
Luftverdrängerpipetten basieren auf einem einfachen Prinzip:
Ein Kolben mit konstantem Durchmesser wird durch eine Dichtung gedrückt, um eine Luftsäule zu bewegen; die Luftbewegung bewegt wiederum die Flüssigkeit in und aus der Einwegpipettenspitze.
Zwischen der Flüssigkeit und dem Ende der Pipette befindet sich ein Luftpolster; die Flüssigkeit berührt die Pipette selbst nie.
Nachdem eine Pipettenspitze aufgesetzt wurde, wird der Kolben aus seiner Ruheposition durch die Kolbendichtung bewegt, um Luft aus der Pipettenspitze zu drücken.
Die Spitze wird knapp unter die Oberfläche der zu aspirierenden Flüssigkeit eingetaucht; der Federkolben kehrt in seine Ruheposition zurück und erzeugt ein Vakuum, das die Pipettenspitze mit Flüssigkeit füllt.
Einstellbare Volumenpipetten verwenden einen Schraubmechanismus, um die Hublänge zu ändern und das Volumen auf 50 % der Nennkapazität einzustellen.
Für Pipetten mit einem Nennvolumen von 100 µL oder mehr wird die Ungenauigkeit einer Luftverdrängerpipette über den gesamten Volumenbereich der Pipette als konstant betrachtet. ISO 8655 Teil 2 gibt diesen Wert mit ≤ ±0,8 % der Nennkapazität an (d. h. ≤ ±0,8 µL für eine 100-µL-Pipette) und er hängt hauptsächlich von der Mechanik der Pipette ab. Bei kleineren Volumina steigt die Ungenauigkeit aufgrund der Kompressibilität der Luft und anderer Faktoren.
Typischerweise geben Pipettendatenblätter oder Kataloge die Genauigkeit als Prozentsatz des Nennvolumens an, oft ohne weitere Angaben, sodass der Benutzer die Auswirkungen selbst bestimmen muss. Bei der Schätzung der Genauigkeit für Teilvolumina bleibt der Zähler (die Ungenauigkeit) gleich; der Nenner (das eingestellte Volumen) ändert sich.
Genauigkeit von Teilvolumina für eine 100-µL-Pipette
| Volume Setting | Percentage of Nominal Capacity | Volume of Inaccuracy | Pipetted Volume Accuracy |
|---|---|---|---|
| 100 µL | 100% | ≤± 0.8 µL | ≤± 0.8% |
| 75 µL | 75% | ≤± 0.8 µL | ≤± 1.1% |
| 50 µL | 50% | ≤± 0.8 µL | ≤± 1.6% |
| 20 µL | 20% | ≤± 0.8 µL | ≤± 4% |
| 10 µL | 10% | ≤± 0.8 µL | ≤± 8% |
Es ist klar, dass eine Luftverdrängungspipette am genauesten bei oder nahe ihrer Nennkapazität arbeitet. Darüber hinaus nimmt die Genauigkeit deutlich ab, wenn das eingestellte Volumen unter 50 % der Nennkapazität fällt. Die meisten Pipetten haben daher einen angegebenen Volumenbereich mit oberen und unteren Grenzwerten.
Die zu pipettierende Flüssigkeitsmenge liegt oft innerhalb des Bereichs mehrerer Pipetten. Zum Beispiel könnten 20 µL mit Pipetten von 2 bis 20 µL, 5 bis 50 µL oder 10 bis 100 µL gemessen werden. Das Volumen würde am genauesten mit der 2–20-µL-Pipette pipettiert. Ist diese Größe nicht verfügbar, wählen Sie die Pipette mit der geringsten Kapazität relativ zum benötigten Volumen. In diesem Fall ist die 5–50-µL-Pipette die bessere Wahl als die Pipette von 10 bis 100 µL.
Wenn Ihr Labor nur Pipetten mit geringfügig überlappenden Bereichen hat, kann die Ergänzung um ein oder zwei Pipetten mit größerer Überlappung die Genauigkeit Ihrer Messungen erhöhen.
Die BRAND Transferpette S ist eine manuelle Ein-Kanal-Pipette, die in zehn verschiedenen einstellbaren Volumengrößen erhältlich ist (0,1 bis 1 µL bis 1 bis 10 mL); diese Größen decken nahezu den gesamten Bereich von 0,5 µL bis 10 mL ab und überlappen die oberen Hälften der Pipettenbereiche. Ebenso sind manuelle Transferpette-Pipetten mit 8 und 12 Kanälen in fünf einstellbaren Volumenbereichen erhältlich (0,5 bis 10 µL bis 30 bis 300 µL) für Probenvolumina von 1 bis 300 µL.
Die BRAND Transferpette ist auch in einer elektronischen Version mit ähnlichen Optionen verfügbar. Fünf verschiedene elektronische Ein-Kanal-Transferpette-Pipetten decken Volumenbereiche von 0,5 bis 10 µL bis 250 µL bis 5 mL ab; fünf Mehrkanal-Modelle decken Volumina von 0,5 bis 10 µL bis 15 bis 300 µL ab.
HINWEIS: In der meisten Fachliteratur wird der Begriff „Genauigkeit“ verwendet, um den Grad der Ungenauigkeit anzugeben. Um mit anderer Literatur konsistent zu bleiben, verwenden wir in diesem Artikel „Genauigkeit“, wenn wir uns auf Prozentsätze beziehen.
