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Molecular Probes™ Alexa Fluor™ 532 C5 Maleimide

Alexa Fluor™ 532 C5 Maleimid

Marke:  Molecular Probes™ A10255

Weitere Details : Netto-Gewicht : 0.00525kg

Artikelnummer. 10062592

  • 544.00 € / 1 Milligramm
Verfügbar ab: 15-04-2024
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Nur für Forschungszwecke. Die Anwendung muss den Produktanweisungen entsprechen.


Beschreibung

Beschreibung

Alexa Fluor™ 532 C5 Maleimid ist ein heller, gelber Fluoreszenzfarbstoff mit einer ideal für die frequenzgedoppelte Nd:YAG-Laserlinie geeigneten Anregung. Der Farbstoff Alexa Fluor™ 532, der für eine stabile Signalerzeugung in der Bildgebung und Durchflusszytometrie verwendet wird, ist wasserlöslich und im Bereich von pH 4 bis pH 10 pH-unempfindlich. Zusätzlich zu reaktiven Farbstoffformulierungen bieten wir Alexa Fluor™ 532 an, der mit einer Vielzahl von Antikörpern, Peptiden, Proteinen, Markierungssubstanzen und Amplifikationssubstraten konjugiert und für die Markierung von Zellen und deren Nachweis optimiert ist.

Das Maleimidderivat von Alexa Fluor™ 532 ist das beliebteste Hilfsmittel für die Konjugierung dieses Farbstoffs mit einem Protein oder Antikörper. Die daraus resultierenden Alexa Fluor™ 532-Konjugate weisen hellere Fluoreszenz- und höhere Lichtbeständigkeit auf als die Konjugate anderer spektral ähnlicher Fluorophore.

Ausführliche Informationen zu diesem Alexa Fluor™ Maleimide:
Fluorophor-Markierung: Alexa Fluor™ 532 Farbstoff
Reaktive Gruppe: Maleimid
Reaktivität: Thiolgruppen an Proteinen und Liganden, Oligonukleotid-Thiophosphaten
Ex/Em des Konjugats: 528/552 nm
Extinktionskoeffizient: 78.000 cm-1M-1
Molekulargewicht: 812.88

Typische Konjugatreaktion
Das Protein sollte beiμeiner Konzentration von 50-100 M in einem geeigneten Puffer (10 bis 100 mM Phosphat, Tris oder HEPES) bei pH 7,0 bis 7,5 aufgelöst werden. In diesem pH-Bereich sind die Thiolgruppen des Proteins so nukleophil, dass sie trotz zahlreich vorhandener Proteinamingruppen, die protoniert und relativ unreaktiv sind, fast ausschließlich mit dem Reagenz reagieren. Wir empfehlen, an diesem Punkt jegliche Disulfidbrücken mit einem Reduktionsmittel 10-fachen molaren Überschusses wie DTT oder TCEP zu reduzieren. Überschüssiges DTT muss durch Dialyse entfernt werden. Anschließend muss eine Thiol-Änderung unter Sauerstoff-freien Bedingungen zur Vermeidung einer Neubildung der Disulfidbrücken durchgeführt werden. Diese Vorsichtsmaßnahmen sind nicht erforderlich, wenn TCEP vor der Maleimid-Konjugation eingesetzt wird.

Alexa Fluor™ Maleimid wird in der Regel unmittelbar vor dem Gebrauch in hochwertigem wasserfreien Dimethylsulfoxid (DMSO) in einer Konzentration von 1 bis 10 mM gelöst. Stammlösungen müssen so weit wie möglich vor Licht geschützt werden. Im Allgemeinen wird diese Stammlösung der Proteinlösung tropfenweise unter Rühren hinzugefügt, um rund 10 bis 20 Mol Reagenz pro Mol Protein zu erzielen. Die Reaktion kann bei Raumtemperatur für 2 Stunden oder bei 4 °C über Nacht und vor Licht geschützt fortfahren. Alle unreagierten Thiol-reaktiven Reagenzien können durch Hinzufügen von überschüssigem Glutathion, Mercaptoethanol oder von anderem löslichen niedermolekularen Thiol verbraucht werden.

Konjugat-Aufreinigung
Markierte Antikörper werden in der Regel von freiem Alexa Fluor™ Farbstoff durch Einsatz einer Gel-Filtrationssäule wie Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 oder Ähnlichem getrennt. Wählen Sie bei sehr großen bzw. kleinen Proteinen ein Gelfiltrationsmedium mit geeigneter molekularer Ausschlussgrenze (MWCO), oder entscheiden Sie sich für eine Reinigung per Dialyse. Wir bieten verschiedene Reinigungskits, die für unterschiedliche Mengen von Antikörperkonjugat optimiert sind:
Antikörperkonjugat-Aufreinigungskit für 0,5 bis 1 mg (A33086)
Antikörperkonjugat-Aufreinigungskit für 20 bis 50 μg (A33087)
Antikörperkonjugat-Aufreinigungskit für 50 bis 100 μg (A33088<)

Weitere Informationen zur Protein- und Antikörpermarkierung
Wir bieten eine große Auswahl an Molecular Probes™ Antikörper- und Proteinmarkierungskits passend für Ihr Ausgangsmaterial und Ihre Versuchsanordnung. Weitere Optionen finden Sie unter Antikörper-Markierungskits, oder nutzen Sie unser Auswahlwerkzeug für die Markierungschemie. Weitere Informationen zu unseren Markierungskits finden Sie unter Protein- und Nukleinsäuremarkierungskits—Kapitel 1.2 im Molecular Probes™-Handbuch.

Bestellen Sie ein individuelles Konjugat
Sollten Sie in unserem Bestandsverzeichnis nicht das Passende finden, erstellen wir Ihnen gern ein Antikörperkonjugat nach Ihren individuellen Vorgaben. Unser individualisierter Konjugationsservice arbeitet effizient und absolut vertraulich, und wir verbürgen uns für höchste Qualität. Wir sind ISO 9001:2000 zertifiziert.
Spezifikation

Spezifikation

1 mg
Tiefgekühlt (bei -5 bis -30 °C), vor Licht geschützt lagern.
Raumtemperatur
Alexa Fluor™ 532
Alexa Fluor™
528 nm
Farbstoff
Thiol
Maleimid
Alexa Fluor Farbstoffe
552 nm
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