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IgG (H+L) kreuzadsorbiertes Ziege-Anti-Kaninchen, Alexa Fluor™ 488, InvitrogenTM

Polyklonaler Sekundärantikörper aus Ziegen

Marke:  Invitrogen A11008

Weitere Details : Netto-Gewicht : 0.00454kg

Artikelnummer. 10729174

  • 249.00 € / 500 Mikroliter

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Nur für Forschungszwecke. Die Anwendung muss den Produktanweisungen entsprechen.


Beschreibung

Beschreibung

Alexa Fluor-Farbstoffe gehören zu den am häufigsten verwendeten Fluoreszenzfarbstoffen auf dem Markt. Invitrogen™ Alexa Fluor™ 488 ist ein heller, grüner Fluoreszenzfarbstoff mit Anregung und eignet sich hervorragend für den 488 nm Laser. Für eine stabile Signalerzeugung bei der Bildgebung und Durchflusszytometrie ist der Alexa Fluor 488-Farbstoff über einen breiten molaren Bereich pH-unempfindlich. Sonden mit hoher Fluoreszenz-Quantenausbeute und hoher Photostabilität ermöglichen mit großer Empfindlichkeit den Nachweis von biologischen Strukturen mit geringer Abundanz. Alexa Fluor 488 Farbstoffmoleküle können ohne signifikantes Selbst-Quenching an Proteine mit hohen Molarraten angefügt werden, was hellere Konjugate und einen empfindlicheren Nachweis ermöglicht. Der Markierungsgrad für jedes Konjugat beträgt typischerweise 2 bis 8 Fluorophormoleküle pro IgG-Molekül; der genaue Markierungsgrad ist auf dem Analysenzertifikat für jede Produktcharge angegeben. Die Ziegen-Anti-Kaninchen-IgG unfragmentierten Antikörperkonjugate werden am häufigsten durch Immunisierung des Wirtstieres mit einer gepoolten Population von Immunglobulinen aus der Zielspezies hergestellt und können weiter aufgereinigt und modifiziert werden (z. B. durch Immunaffinitätschromatographie, Antikörperfragmentierung, Markierungskonjugation usw.), um hochspezifische Reagenzien zu erzeugen. In der ersten Reinigungsrunde werden ganze Immunglobuline, die an den Immunisierungsantikörper binden, zurückgewonnen.

Die weitere Aufreinigung mit Protein A oder G entfernt alle Immunglobulinklassen außer IgG, sodass die affinitätsgereinigten Antikörper mit IgG-Schwerketten und allen Klassen von Immunglobulin-Leichtketten von Kaninchen reagieren. Um die Kreuzreaktivität zu minimieren, wurden diese Ziege-Anti-Kaninchen unfragmentierten Antikörper gegen Human-IgG, Humanserum, Maus-IgG, Mausserum und Rinderserum kreuzadsorbiert. Die Kreuzadsorption oder Voradsorption ist ein Reinigungsschritt zur Erhöhung der Spezifität des Antikörpers, was zu einer höheren Empfindlichkeit und weniger Hintergrundfärbung führt. Die sekundäre Antikörperlösung wird durch eine Säulenmatrix geleitet, die immobilisierte Serumproteine potenziell kreuzreaktiver Spezies enthält. In der Säule werden nur die nicht-spezifisch bindenden sekundären Antikörper erfasst. Die hochspezifischen Sekundärantikörper fließen hindurch. Die Vorteile dieses zusätzlichen Schritts zeigen sich bei Multiplexing-/Mehrfarben-Färbeexperimenten, bei denen eine Kreuzreaktivität mit anderen primären Antikörpern möglich ist, oder bei immunhistochemischen Experimenten, bei denen endogene Immunglobuline vorhanden sein können. Ein stark kreuzadsorbiertes Sekundärantikörperäquivalent (oder ein äquivalentes Sekundärantikörperpräparat) finden Sie unter der Produktkatalognummer A11034. Verwenden von Konjugatlösungen: Zentrifugieren Sie die Proteinkonjugatlösung vor Verwendung kurz in einer Mikrozentrifuge. Fügen Sie dem Experiment nur den Überstand hinzu. Dieser Schritt eliminiert alle Proteinaggregate, die sich während der Lagerung gebildet haben, und reduziert so die unspezifische Hintergrundfärbung. Da die Färbeprotokolle je nach Anwendung unterschiedlich sind, sollte die geeignete Verdünnung des Antikörpers empirisch bestimmt werden. Für die Fluorophor-markierten Antikörper sollte eine Endkonzentration von 1 bis 10 μg/ml bei den meisten immunhistochemischen und durchflusszytometrischen Anwendungen ausreichend sein. Wir bieten eine umfangreiche Reihe von Invitrogen™ Sekundärantikörperkonjugaten mit gut charakterisierter Spezifität an, die mit einer großen Auswahl an Premium-Fluoreszenzfarbstoffen, einschließlich Invitrogen™ Alexa Fluor™ Fluoreszenzfarbstoffen, markiert sind. Fluoreszierende Sekundärantikörperkonjugate sind für den Nachweis, die Sortierung oder die Aufreinigung des angegebenen Ziels nützlich und eignen sich ideal für Fluoreszenzmikroskopie und konfokale Laser-Scanning-Mikroskopie, Durchflusszytometrie und fluoreszierenden Western-Nachweis. Die breite Palette an angebotenen Fluoreszenzmarkern ermöglicht den Zuschnitt unserer Reagenzien auf nahezu jedes Fluoreszenznachweissystem. Sekundäre Antikörper können in drei Formaten bereitgestellt werden: Voll-IgG, zweiwertige F(ab′)2-Fragmente und monovalente Fab-Fragmente. Aufgrund des hohen Erhaltungsgrades in der Struktur vieler Immunglobulin-Domänen müssen die meisten klassenspezifischen sekundären Antikörper affinitätsgereinigt und kreuzadsorbiert werden, um eine minimale Kreuzreaktion mit anderen Immunglobulinen zu erzielen.
Spezifikation

Spezifikation

Kaninchen-IgG (H+L), kreuzadsorbiert
polyklonal
Alexa Fluor™ 488
Flüssigkeit
Gamma-Immunoglobine, schwere und leichte Ketten
Gereinigt
RUO
Sekundärantikörper
polyklonal
Durchflusszytometrie, Immunzytochemie, Immunfluoreszenz
2 mg/ml
PBS mit 5 mM Natriumazid; pH 7,5
Ziege
IgG
1mg
Bei 4 °C im Dunkeln lagern
Sekundär
Rabbit
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Sicherheitsdatenblatt (SDS)
Dokumentation