Invitrogen™ CellSensor™ NFAT-bla CHO-K1 Cell Line

Beschreibung

Die Superfamilie der G-Protein-gekoppelten Rezeptoren (GPCR) besteht schätzungsweise aus 600 bis 1.000 Mitgliedern und ist die größte bekannte Klasse molekularer Ziele mit nachgewiesenem therapeutischem Wert. GPCR sind entscheidend für die Übertragung einer Vielzahl chemischer Botschaften von der extrazellulären Umgebung in das Innere der Zelle. GPCRs sind an einer Vielzahl von Erkrankungen beteiligt, u. a. Allergien, kardiovaskuläre Dysfunktion, Depression, Adipositas, Krebs, Schmerz, Diabetes und verschiedene Erkrankungen des Zentralnervensystems. Die GPCR-Signalgebung wird durch trimere G-Proteine vermittelt, die α-, β- undγ-Untereinheiten enthalten, und kann entsprechend der Zusammensetzung der Untereinheiten in Signalisierungsklassen eingeteilt werden. G-alpha-, G-alpha-s- und G-alpha-i/o-Proteine vermitteln intrazelluläre Signalgebung durch Aktivierung von Signalwegen, die zu eindeutigen physiologischen Endpunkten führen. Die Aktivierung von G-alpha-s- und G-alpha-i/o-gekoppelten Rezeptoren führt zur Stimulation bzw. Hemmung der Adenylatcyclase; die Aktivierung von G-alpha-q-gekoppelten Rezeptoren führt zur Stimulation der Phospholipase C. Die GPCR-Signalgebung über diese unterschiedlichen Signalwege kann durch die Aktivierung spezifischer transkriptioneller Response-Elemente überwacht werden, die einem Reportergen vorgelagert sind. Invitrogen hat GeneBLAzer™ Master-Zelllinien entwickelt, die das Beta-Lactamase-Reportersystem verwenden, das sowohl für Agonisten als auch für Antagonisten von GPCR verwendet werden kann, die sich mit jedem der oben genannten Signalwege verbinden. Diese zellbasierten Assays verwenden ein membrandurchlässiges fluoreszierendes Substrat (CCF4-AM oder CCF2-AM). Dies ermöglicht eine ratiometrische Messung, die Fehler aufgrund der Probenvariabilität reduziert, zu ausgezeichneten Z'-Faktorwerten führt und eine Miniaturisierung der Assays ermöglicht. GeneBLAzer™ Master-Zelllinien mit NFAT- oder CRE-Response-Elementen sind in Jurkat, CHO-K1 oder FreeStyle™ 293F-Zellhintergründen (insgesamt sechs Zelllinien) zur Entwicklung von Assays im Suspensions- oder Adhäsions-Zellformat erhältlich. Stabile Zelllinien mit einem NFAT-Response-Element vor dem Beta-Lactamase-Gen sind für die Untersuchung von Gq-gekoppelten Rezeptoren konzipiert. Stabile Zelllinien mit einem cAMP-Response-Element (CRE) vor dem Beta-Lactamase-Gen sind für die Untersuchung von mit G_s-gekoppelten Rezeptoren konzipiert. Freestyle™ 293F-Zellen sind HEK 293-Zellen, die für das Wachstum in Suspension in serumfreien Medien angepasst wurden. Alternativ können diese Zellen in Gegenwart von Serum im adhärenten Format kultiviert werden. Kunden aus dem akademischen und gemeinnützigen Bereich fragen bitte nach Sonderpreisen.