Invitrogen™ Glucose Colorimetric Detection Kit

Das Glukose-Nachweiskit für Forschungszwecke ist ein kolorimetrischer Assay, der für die Quantifizierung und Detektion von Glukose in Serum, Plasma, Urin, Puffern und Gewebekulturmedien entwickelt wurde.

Dieses gebrauchsfertige Komplettkit enthält durchsichtige 96-Well-Mikrotiterplatte(n), Glukosestandard, Assaypuffer und andere Komponenten zur Durchführung des Assays. Für die Verwendung dieses Kits ist ein 96-Well-Mikrotiterplatten-Lesegerät erforderlich, das die optische Dichte bei 560 nm ablesen kann.

Leistungsmerkmale
• Assay-Typ: Kolorimetrisches Nachweiskit
• Probentypen: Serum, Plasma, Urin, Puffer und Gewebekulturmedien
• Empfindlichkeit: 0,413 mg/dl
• Standardkurvenbereich: 0,5 – 32 mg/dl
• Reaktivität: artunabhängig

Hintergrund
Glukose ist mit Abstand das häufigste Kohlenhydrat. Es ist ein Monosaccharid, eine Aldose, eine Hexose und ein reduzierender Zucker und wird auch als Dextrose bezeichnet, da es dextratorotatorisch ist (d. h. polarisiertes Licht im Uhrzeigersinn dreht). Die Struktur von Glukose ist untenstehend als gerade Kette und zyklische Formen dargestellt. Für alle biologischen und molekularen Vorgänge und für viele Zellfunktionen ist Energie unerlässlich.

Energie ist in Form von ATP (Adenosintriphosphat) verfügbar, von dem die meisten durch aerobe Zellatmung von Kohlenhydraten und Glukose, der Hauptquelle biologischer freier Energie in höheren Organismen, erzeugt werden. Reduzierte Energieniveaus bedrohen die zelluläre Homöostase und Integrität. Eine Beeinträchtigung des Energiestoffwechsels kann pro-apoptotische Signale (programmierten Zelltod), oxidative Schäden, Exzitotoxizität auslösen und die Reparatur mitochondrialer DNA behindern.

Assay-Prinzip
Das kolorimetrische Glukose-Nachweiskit dient der quantitativen Bestimmung von Glukose in einer Vielzahl von Proben. Zur Erzeugung einer Standardkurve für den Assay wird ein Beta-D-Glukose-Standard bereitgestellt und alle Proben sollten von der Standardkurve abgelesen werden. Die Proben werden mit dem kolorimetrischen Substrat und der Meerrettich-Peroxidase gemischt und die Reaktion durch Zugabe von Glukoseoxidase ausgelöst. Die Reaktion wird 30 Minuten lang bei Raumtemperatur inkubiert. Die Glukoseoxidase reagiert mit Glukose, um Wasserstoffperoxid zu erzeugen, das in Gegenwart von HRP mit dem kolorimetrischen Substrat reagiert, um das farblose Substrat in ein rosafarbenes Produkt umzuwandeln. Das rosafarbene Produkt wird bei 560 nm gelesen. Steigende Glucose-Konzentrationen führen zu einer linearen Farbsteigerung.