Invitrogen™ Hemoglobin Colorimetric Detection Kit

Beschreibung

Das Kit für den Hämoglobinnachweis, das nur für Forschungszwecke verwendet wird, ist ein kolorimetrischer Assay, der für die Quantifizierung und den Nachweis von Hämoglobin in Vollblut, Erythrozyten und hämolysierten Serum- und Plasmaproben entwickelt wurde.

Dieses vollständige, gebrauchsfertige Kit enthält durchsichtige 96-Well-Mikrotiterplatte(n), Hämoglobinstandard und andere Komponenten zur Durchführung des Assays. Für die Verwendung dieses Kits ist ein 96-Well-Mikrotiterplatten-Lesegerät erforderlich, das die optische Dichte zwischen 560 und 580 nm ablesen kann.

Leistungsmerkmale
• Assay-Typ: Kit für den kolorimetrischen Nachweis
• Probentypen: Vollblut, Erythrozyten und hämolysierte Serum- und Plasmaproben
• Empfindlichkeit 0,021 g/dl
• Standardkurvenbereich: 0,25 bis16 g/dl
• Reaktivität: Artunabhängig

Hintergrund
Hämoglobin (Hgb) ist ein Erythrozyten-Proteinkomplex, der aus zwei Sätzen identischer Paare von Untereinheiten besteht, von denen jede eine Eisenporphyringruppe bindet, die meist als Häme bezeichnet wird. Enthält im Allgemeinen zwei Alpha- oder alpha-ähnliche Globulinketten, die restlichen Untereinheiten können Beta, Gamma, Delta oder Epsilon sein, oder bei Säuglingen fetales Hämoglobin, das im ersten Lebensjahr ersetzt wird. Häme bindet und setzt Sauerstoff oder Kohlenstoffdioxid frei, wenn sich die lokale Gasspannung geringfügig ändert. Freier Sauerstoff oder freies Kohlenstoffdioxid, der bzw. das durch eine Hämgruppe gebunden wird, erleichtert die anschließende Bindung durch die anderen Hämgruppen in einem bestimmten Hämoglobinmolekül.

Assay-Prinzip
Das Kit für den kolorimetrischen Hämoglobinnachweis wurde entwickelt, um alle Formen von Hämoglobin quantitativ zu messen, die in Blut und Erythrozyten oder Plasma und Serum vorhanden sind. Ein humaner Hämoglobin-Standard wird zur Erstellung einer Standardkurve für den Assay bereitgestellt, und alle Proben sollten von der Standardkurve abgelesen werden. Standards oder verdünnte Proben werden in eine durchsichtige Mikrotiterplatte pipettiert, und das gebrauchsfertige Hämoglobin-Nachweisreagenz wird jedem Well hinzugefügt. Für Vollblut- oder Erythrozytenproben werden 10 μl-Proben und Standards im regulären Format verwendet. Die Ergebnisse werden in g/dl für Vollblut und Erythrozyten und mg/ml für Serum und Plasma berechnet. Die Platte wird 30 Minuten lang bei Raumtemperatur inkubiert. Die Platte wird bei 560 bis 580 nm gelesen, um die Intensität der erzeugten Farbe zu erkennen. Dieses Hämoglobin-Detektionskit verwendet eine einzige Reaktionslösung, die bei 4 °C lichtbeständig ist und keine gefährlichen Chemikalien enthält. Alle Formen von Hämoglobin werden schnell in eine einzelne stabile Form umgewandelt, die photometrisch gemessen wird. Viele Proben können in diesem sicheren, einfachen Assay ohne Verdünnung gemessen werden.