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Invitrogen™ Zero Blunt™ TOPO™ PCR Cloning Kit, without competent cells

Eine hocheffiziente, 5-minütige Klonierungsstrategie in einem Schritt („TOPO™-Klonierung“) für das direkte Einfügen von mittels thermostabiler Proofreading-Polymerasen amplifizierter PCR-Produkte mit stumpfen Enden in einen Plasmidvektor

Marke:  Invitrogen™ 450245

Weitere Details : Netto-Gewicht : 0.00454kg

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Artikelnummer. 11596885

  • 362.00 € / 1 Stück

Auf Lager, versandfertig: 17

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Nur für Forschungszwecke. Die Anwendung muss den Produktanweisungen entsprechen.


Beinhaltet: Linearisierter und Topoisomerase I-aktivierter pCR™Blunt II-TOPO™ Vektor, Salzlösung, dNTPs, Kontroll-Template, M13-Vorwärts- und -Rückwärts-Primer, steriles Wasser

Beschreibung

Beschreibung

Enthält den Zero Blunt TOPO Vektor mit dem ccdB-Gen für positive Auswahl, das nur Wachstum von rekombinanten Plasmidvektoren zulässt. Resistent gegen Kanamycin (KanR) und Zeocin™ (ZeoR).
pCRBlunt II-TOPO Vektor: entwickelt für das Proofreading von Polymerasen
Der pCRBlunt II-TOPO Vektor ist ausgelegt für das Klonen von PCR-Produkten mit stumpfem Ende, die durch thermostabile Proofreading-Polymerasen wie Platinum™ Pfx DNA-Polymerase generiert werden. Der pCRBlunt II-TOPO Vektor enthält:

  • EcoRI-Schnittstellen zu beiden Seiten der Insertionsstelle des PCR-Produkts ermöglichen die problemlose Exzision von Inserts
  • Kanamycin und Zeocin Resistenzgene für Ihre individuelle Auswahl an E. coli
  • SP6-Promotor/Primer-Stelle zur In-vitro-RNA-Transkription und Sequenzierung
  • M13-Vorwärts- und Rückwärtsprimer-Stellen für Sequenzierung oder PCR-Screening
Auswahl des pCRBlunt II-TOPO Klons
pCRBlunt II-TOPO ermöglicht die direkte Auswahl von Rekombinanten durch Trennung des tödlichen E. coli-Gens ccdB. Der Vektor enthält das ccdB-Gen, das mit dem C-Terminus des LacZα-Fragments fusioniert. Die Ligation eines PCR-Produkts mit stumpfem Ende unterbricht die Expression der LacZα-ccdB-Genfusion, wodurch nur das Wachstum von positiven Rekombinanten nach der Transformation ermöglicht wird. Zellen, die einen nicht rekombinanten Vektor enthalten, werden nach dem Auftragen auf Platten abgetötet. Aus diesem Grund ist kein Blau-Weiß-Screening erforderlich.
Vereinfachtes Klonen basierend auf TOPO
Mit dem TOPO Verfahren sind für die Klonierung weder PCR-Primer mit bestimmten Sequenzen noch post-PCR-Verfahren, eine Vektor-Vorbereitung oder andere zeitintensive Schritte zur DNA-Manipulation erforderlich. Geben Sie Ihre PCR-Reaktion einfach zum mitgelieferten Vektor mit gebundener Topoisomerase, warten Sie 5 Minuten und führen Sie die Transformation kompetenter E. coli-Zellen durch.
Effiziente Klonierung
Dadurch, dass bis zu 95 % der Klone das gewünschte Insert tragen, verringert sich das Screening der Klone auf ein Minimum, was Zeit und Geld einspart. Der in diesem Kit verwendete pCRBlunt II-TOPO Vektor wird mit dem tödlichen ccdB-Gen geliefert und sorgt so für eine effiziente Auswahl von rekombinanten pCR-Produkten mit stumpfen Enden, die von thermostabilen Proofreading-Polymerasen generiert werden.
Der Standard für die Klonierung
Bei der Klonierung ist das TOPO™ Verfahren seit über zehn Jahren für Tausende von Wissenschaftlern ein verlässlicher Partner. Die schnelle, einfache und effiziente TOPO™ Klonierung kam bereits bei einer Vielzahl von Vektoren und in unterschiedlichsten Anwendungen zum Einsatz.
Optionen für Zero Blunt TOPO PCR-Klonierungskit
Das Zero Blunt TOPO PCR-Klonierungskit zur direkten Einführung von PCR-Produkten mit stumpfem Ende in einen Plasmidvektor kann, je nach Bedarf, mit einer Vielzahl kompetenter Zellen, die sich durch unterschiedliche Vorteile auszeichnen, erworben werden:
Allgemeine Klonierung: TOP10-Zellen (Bestellnr. Nr. K2800-20, K2800-40)
Hocheffiziente Klonierung: TOP10 Electrocomp™ Zellen (Kat.- Nr. K2860-01, K2860-40)
Allgemeine Klonierung, Resistenz gegen Bakteriophage T1: DH5α-T1R (Kat.- Nr. K2820-20, K2820-40)
Schnelles Wachstum: Mach1™-T1 R chemisch kompetente E. coli (Kat.- Nr. K2830-20)
Stellen Sie Ihre eigenen Zellen bereit: Mehr Flexibilität und Kosteneffizienz (Katalognummer Nr. 450254)
Eine Version des Kits umfasst ein PureLink™ Quick Plasmid-Miniprep-Kit (Kat.- Nr. K2800-02) für die Isolierung von sauberem, sequenzbereiten, rekombinanten Plasmid ist ebenfalls erhältlich.

  • Schnell und praktisch: von der PCR zum Klon in nur drei Schritten und 5 Minuten
  • Effizient: Bis zu 95 % Klone mit dem korrekten Insert
  • Bewährt: zuverlässige Leistung seit über einem Jahrzehnt mit über 4,000 Referenzen
  • Einfach: keine Ligase, Post-PCR-Verfahren oder PCR-Primer bestimmter Sequenzen erforderlich
  • Vektor: pCR™Blunt II-TOPO Vektor: Enthält das ccdB-Gen, was eine direkte Auswahl von Rekombinanten ermöglicht
  • Klonierungsmethode: TOPO Klonierung: Topoisomerase I-basierte, 5-minütige Ligation von Blunt-End-PCR-Produkten, verstärkt mit Proofreading von thermostabilen Polymerasen
  • Kompetente Zellen: Verschiedene Optionen: Auswahl aus Kits mit allgemeinen, hocheffizienten, bakteriophagen T1-beständigen, schnell wachsenden kompetenten Zellen (separat erhältlich) oder verwenden Sie Ihre eigene
  • Antibiotische Resistenz: Ampicillin (AmpR), Kanamycin (KanR)

Klonierung, PCR-Klonierung

Bestellinformation

Versandbedingung: Trockeneis

Spezifikation

Spezifikation

Kanamycin (KanR), Zeocin™ (ZeoR)
Blunt TOPO®
No
Proof-Reading Polymerase
pUC Origin
Blunt DNA Cloning Vectors, TOPO Cloning Vectors, pCR
Not Included
Box 1:
• Linearized and topoisomerase I-activated pCR™Blunt II-TOPO® vector
• Salt solution
• dNTPs
• Control template
• M13 forward and reverse primers
• Sterile water

Store at -5 to -30°C.
All reagents are stable for 6 months when properly stored.
20 Reactions
TOPO®, Zero Blunt®
Dry Ice
Videos
Sicherheitsdatenblatt (SDS)
Dokumentation