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Invitrogen™ LanthaScreen™ TR-FRET Androgen Receptor Coactivator Assay Kit

Artikelnummer. 15302098
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Menge:
800 x 20 μL Assays
Unit Size:
1 Set
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Product Code. Menge unitSize
15302098 800 x 20 μL Assays 1 Set
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Nur für Forschungszwecke. Die Anwendung muss den Produktanweisungen entsprechen.
Product Code. 15302098 Supplier Invitrogen™ Supplier No. A15878

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Nur für Forschungszwecke. Die Anwendung muss den Produktanweisungen entsprechen.

Description

LanthaScreen™ TR-FRET-Koaktivator-Assay-Kit für den Androgenrezeptor

Das LanthaScreen™ TR-FRET Assay-Kit für Androgenrezeptor-Koaktivator bietet eine empfindliche und zuverlässige Methode für das Hochdurchsatz-Screening potenzieller Androgenrezeptor (AR)-Liganden als Agonisten der Koaktivator-Rekrutierung oder Antagonisten der Agonisten-abhängigen Koktivator-Rekrutierung. Sowohl im Agonisten- als auch im Antagonistenmodus verwendet der homogene gebrauchsfertige Assay eine Ratten-AR-Ligand-bindende Domäne (AR-LBD), die mit Hexahistidin und Glutathion-S-Transferase (GST) (auch separat erhältlich) markiert ist, einen mit Terbium (Tb) markierten Anti-GST-Antikörper und ein Fluorescein-markiertes Koaktivatorpeptid.

Agonisten-Modus
Bei der Ausführung des LanthaScreen TR-FRET Assays für Androgenrezeptor-Koaktivator im Agonisten-Modus (zum Nachweis von Agonistenverbindungen) wird AR-LBD zu Liganden-Testverbindungen hinzugegeben, gefolgt von einem Gemisch aus dem Fluorescein-Koaktivatorpeptid und dem Tb-markierten Anti-GST-Antikörper. Nach der Inkubation bei Raumtemperatur wird das TR-FRET-Emissionsverhältnis (520:495 nm) berechnet und zur Bestimmung der EC50 aus einer Dosis-Reaktions-Kurve der Verbindung verwendet. Die EC50 dieses Liganden ist ein zusammengesetzter Wert für die Menge an Liganden, die zur Bindung an den Rezeptor, Induktion einer Konformationsänderung und Rekrutierung des Koaktivatorpeptids erforderlich ist (siehe Abbildung).

Antagonisten-Modus
Bei der Ausführung des LanthaScreen TR-FRET Assays Androgenrezeptor-Koaktivator im Antagonisten-Modus (zum Nachweis von Antagonistenverbindungen) wird AR-LBD zu Liganden-Testverbindungen hinzugegeben, gefolgt von einem Gemisch aus dem DHT-Agonisten, Fluorescein-Koaktivatorpeptid und Tb-Anti-GST-Antikörper. Die in diesem Modus verwendete Konzentration von DHT-Agonisten ist die EC80-Konzentration, die durch die erste Ausführung des Assays im Agonisten-Modus bestimmt wird. Ein Beispiel für Daten, die im Antagonisten-Modus gewonnen werden, ist in der folgenden Abbildung dargestellt.
TRUSTED_SUSTAINABILITY

Specifications

Menge 800 x 20 μL Assays
Inhalt und Lagerung 1 Röhrchen rekombinantes Protein mit AR-Ligandenbindungsdomäne (bei -68 bis -85 °C lagern)
1 Röhrchen mit Peptid (bei -5 bis -30 °C lagern)
2 Flaschen TR-FRET-Puffer (bei -5 bis -30 °C lagern)
1 Röhrchen Tb-Anti-GST Ab (bei -5 bis -30 °C lagern)
1 Röhrchen DTT (bei -5 bis -30 °C lagern)
Produktlinie LanthaScreen
Zur Verwendung mit (Anwendung) Assay für Interaktionen mit Kofaktoren, Kernrezeptorassay
Ligand AR
Produkttyp TR-FRET Androgen-Rezeptor-Koaktivator-Assay-Kit
No. of Assays 800 x 20 μL assays

Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.

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