Invitrogen™ LanthaScreen™ TR-FRET FXR Co-Aktivator Assay-Kit, Kaninchen

Beschreibung

Dieses Kit enthält Kaninchen-Tb-Anti-GST-Antikörper; andere Kit-Komponenten sind identisch mit Kit PV4833:

Das LanghaScreen™ TR-FRET-Assay-Kit mit FXR- (Farnesoid X Rezeptor) Koaktivator bietet eine empfindliche und robuste Methode für das Hochdurchsatz-Screening potenzieller FXR-Liganden als Agonisten der Koaktivator-Rekrutierung. Das Kit verwendet einen mit Terbium (Tb) markierten Anti-GST-Antikörper, ein Fluorescein-markiertes Koaktivatorpeptid und eine mit Glutathion-S-Transferase (GST) getaggte FXR-Liganden-bindende Domäne (FXR-LBD) im Format eines Assays mit einem homogenen gebrauchsfertigen Gemisch.

Zur Ausführung des Assays:
Bei der Ausführung des LanthaScreen™ TR-FRET-Koaktivator-Assays für FXR im Agonisten-Modus wird FXR-LBD zu Liganden-Testverbindungen hinzugegeben, gefolgt von einer Mischung aus dem Fluorescein-Koaktivatorpeptid und dem Tb-markierten Anti-GST-Antikörper. Nach einer Inkubationszeit bei Raumtemperatur wird das 520 nm/495 nm-TR-FRET-Verhältnis berechnet und zur Bestimmung der EC50 aus einer Dosis-Reaktions-Kurve der Verbindung verwendet. Basierend auf der Biologie der FXR-Koaktivatorpeptid-Interaktion ist die EC50 des Liganden ein zusammengesetzter Wert für die Menge des Liganden, die zur Bindung an den Rezeptor, für eine Konformationsänderung und die Rekrutierung des Koaktivatorpeptids erforderlich ist (Abb. 1).