Invitrogen™ LanthaScreen™ TR-FRET LXR alpha Coactivator Assay Kit, goat

Beschreibung

Dieses Kit enthält Ziege-Tb-Anti-GST-Antikörper; die anderen Kit-Komponenten sind identisch mit Kit A15128:

Der LanthaScreen™ TR-FRET LXR (Leber-X-Rezeptor)-alpha-Koaktivator-Assay bietet eine empfindliche und zuverlässige Methode für das Hochdurchsatz-Screening potenzieller LXR-alpha-Liganden als Agonisten der Koaktivatorrekrutierung. Das Kit verwendet einen mit Terbium (Tb) markierten Anti-GST-Antikörper, ein Fluorescein-markiertes Koaktivatorpeptid und eine LXR-alpha-ligandenbindende Domäne, die mit Glutathion-S-Transferase (GST) getaggt ist, im Format eines Assays mit einem homogenen gebrauchsfertigen Gemisch.

Bei der Durchführung des LanthaScreen™ TR-FRET LXR-alpha-Koaktivator-Assays wird LXR-alpha-LBD zu Liganden-Testverbindungen hinzugefügt, gefolgt von einer Mischung aus Fluorescein-Koaktivator-Peptid und Tb-markiertem Anti-GST-Antikörper. Nach einer Inkubationszeit bei Raumtemperatur wird das 520 nm/495 nm-TR-FRET-Verhältnis berechnet und zur Bestimmung der EC₅₀ aus einer Dosisreaktionskurve der Verbindung verwendet. Basierend auf der Biologie der LXR-alpha-Koaktivator-Peptidinteraktion ist der EC₅₀-Wert des Liganden ein zusammengesetzter Wert, der die Menge an Ligand darstellt, die zur Bindung an den Rezeptor, zur Auswirkung einer Konformationsänderung und zur Rekrutierung von Koaktivator-Peptid erforderlich ist (Abbildung 1).

Inhalt und Lagerung:
Das LanthaScreen™ TR-FRET Assay-Kit für LXR-alpha-Koaktivator enthält das LXR-alpha-LBD (GST)-Protein, fluoreszierend markiertes TRAP220/DRIP-2-Koaktivatorpeptid, Tb-markierten Anti-GST-Antikörper und mehrere Puffer. Lagerung der Komponenten wie im Assay-Protokoll angegeben (-80 °C, -20 °C oder +4 °C).