Invitrogen™ LanthaScreen™ TR-FRET LXR beta Coactivator Assay Kit, rabbit

Beschreibung

Dieses Kit enthält Kaninchen-Tb-Anti-GST-Antikörper; die anderen Kit-Komponenten sind identisch mit Kit PV4658:

Der LanthaScreen™ TR-FRET LXR(Leber-X-Rezeptor)-beta-Koaktivator-Assay bietet eine empfindliche und zuverlässige Methode für das Hochdurchsatz-Screening potenzieller LXR-beta-Liganden als Agonisten der Koaktivator-Rekrutierung. Das Kit verwendet einen mit Terbium (Tb) markierten Anti-GST-Antikörper, ein Fluorescein-markiertes Koaktivatorpeptid und eine LXR-beta-Liganden-bindende Domäne (LBD), die mit Glutathion-S-Transferase (GST) markiert ist, in einem homogenen „Mix-and-Read“-Assay-Format.

Funktionsweise:
Bei der Durchführung des LanthaScreen™ TR-FRET LXR-beta-Koaktivator-Assays wird LXR-beta-LBD zu Liganden-Testverbindungen hinzugefügt, gefolgt von einer Mischung aus Fluorescein-Koaktivatorpeptid und Tb-markiertem Anti-GST-Antikörper. Nach einer Inkubationszeit bei Raumtemperatur wird das 520 nm/495 nm-TR-FRET-Verhältnis berechnet und kann zur Bestimmung der EC50 anhand einer Dosisreaktionskurve der Verbindung verwendet werden. Basierend auf der Biologie der LXR-beta-Koaktivatorpeptid-Interaktion ist der EC50-Wert dieses Liganden ein zusammengesetzter Wert, der die Menge an Ligand darstellt, die zur Bindung an den Rezeptor, Induktion einer Konformationsänderung und Rekrutierung des Koaktivatorpeptids erforderlich ist (Abbildung 1).

Inhalt und Lagerung:
Das LanthaScreen™ TR-FRET-Koaktivator-Assay-Kit für LXR-beta enthält LXR-beta-LBD (GST)-Protein, fluoreszierend markiertes D22-Koaktivatorpeptid, Tb-markierten Anti-GST-Antikörper und mehrere Puffer. Lagerung der Komponenten wie im Assay-Protokoll angegeben (-80 °C, -20 °C oder +4 °C).