Invitrogen™ LanthaScreen™ TR-FRET-Assay-Kit für TR-beta-Koaktivator (Ziege)

Beschreibung

Dieses Kit enthält Ziege-Tb-Anti-GST-Antikörper; die anderen Kit-Komponenten sind mit Kit A15135 identisch:

Das LanthaScreen™ TR-FRET Assay-Kit für TR (Schilddrüsenrezeptor)-beta-Koaktivator bietet eine empfindliche und zuverlässige Methode für das Hochdurchsatz-Screening potenzieller TR-beta-Liganden als Agonisten der Liganden-abhängigen Koaktivator-Rekrutierung. Das Kit verwendet einen mit Terbium (Tb) markierten Anti-GST-Antikörper, ein Fluorescein-markiertes Koaktivatorpeptid und eine humane rekombinante TR-beta-Liganden-bindende Domäne (TR-beta-LBD), die mit Glutathion-S-Transferase (GST) getaggt ist, im Format eines Assays mit einem homogenen gebrauchsfertigen Gemisch.

Zur Ausführung des Assays:
Bei der Ausführung des LanthaScreen™ TR-FRET Assay-Kits für TR-beta-Koaktivator wird TR-beta-LBD zu Liganden-Testverbindungen hinzugegeben, gefolgt von einem Gemisch aus dem Fluorescein-Koaktivatorpeptid und Tb-Anti-GST-Antikörper. Nach einer Inkubationszeit bei Raumtemperatur wird das 520 nm/495 nm-TR-FRET-Verhältnis berechnet und kann zur Bestimmung der EC₅₀ aus einer Dosis-Reaktions-Kurve der Verbindung. Die Liganden-EC basiert auf der Biologie der TR-beta-Koaktivatorpeptid-Interaktion und₅₀ ist ein zusammengesetzter Wert für die Menge an Liganden, die zur Bindung an den Rezeptor, Induktion einer Konformationsänderung und Rekrutierung von Koaktivatorpeptid erforderlich ist (Abb. 1).

Inhalt und Lagerung:
Das LanthaScreen™ TR-FRET Assay-Kit für TR-beta-Koaktivator enthält das TR-beta-LBD (GST)-Protein, fluoreszierend markiertes SRC2-2-Koaktivatorpeptid, Tb-markierten Anti-GST-Antikörper und Puffer. Lagerung der Komponenten wie im Assay-Protokoll angegeben (-80 °C, -20 °C oder +4 °C).