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Thermo Scientific™ North2South™ Biotin Random Prime DNA Labeling Kit

Erstellen Sie biotinylierte DNA-Matrizen für DNA-Hybridisierungs- und Nachweismethoden mit zufälligen Heptanukleotiden, Klenow-Fragmenten und Biotin-Nukleotiden.

Marke:  Thermo Scientific™ 17075

Weitere Details : Netto-Gewicht : 4.08230kg

Artikelnummer. 10229423

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Beschreibung

Beschreibung

Das Thermo Scientific™ North2South Zufallsprimer-DNA-Biotinylierungskit verwendet zufällig ausgewählte Heptanukleotide, Klenow-Fragment und Biotin-Nukleotide zur Erstellung von biotinylierten DNA-Templates für DNA-Hybridisierungs- und Nachweismethoden.

Zufällige Heptanukleotide, die alle möglichen Sequenzen enthalten, werden an ein denaturiertes DNA-Template gebunden. Diese dienen als Primer für die komplementäre Strangsynthese durch DNA-Polymerase. Biotinylierte dNTPs im Reaktionsgemisch werden in die neu synthetisierte DNA integriert. Dieses Protokoll liefert mit Biotin markierte DNS mit hoher Aktivität als Probe in Hybridisierungsexperimenten wie z.B. Southern und Northern Hybridisierungen. Die entstehenden Hybride können mit Streptavidin-Meerrettichperoxidase (HRP) nachgewiesen werden.

Leistungsmerkmale:

  • Höchste Empfindlichkeit – Markierungen mit biotinyliertem dUTP maximieren die Streptavidin-HRP-Bindung und erhöhen die Empfindlichkeit
  • Funktioniert bereits ab einer Start-DNA-Template-Menge von 100 ng
  • Exonukleasefreies Klenow-Fragment erzeugt eine höhere Ausbeute
  • Jede Reaktion liefert eine Sonde, die für etwa drei (10 x 10 cm) Blots ausreicht
Spezifikation

Spezifikation

Ausreichend für: 10 Biotin-Markierungsreaktionen (jeweils mit 100 ng DNA)
• Heptanukleotid-Mischung (5X), 100 µl
• Desoxynukleotid-Mischung (5X), 80 µl
• Reaktionspuffer (10X), 50 µl
• Klenow-Fragment aus DNA-Polymerase (5 U/µl), 10 µl
• Kontroll-DNA (250 ng/µl), 5 µl
• Ammoniumacetat (5M), 1 ml
• EDTA (0,5 M, pH 8,0), 1 ml
• Nukleasefreies Wasser, 1 ml
• Biotin-11-dUTP, 20 µl

Alle Komponenten bei -20 °C lagern.
DNA
North2South™
10 Reaktionen
Kit
10
DNA-Markierungskit
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