Invitrogen™ ELISA-Kit, human, für AKT (Gesamt)

Beschreibung

Kit is designed to detect and quantify the level of AKT (Total) in fresh or frozen human cell lysates. Cross-reactivity in mouse and rat cell lysates has been observed. The assay recognizes both natural and recomb. AKT (Total), independent of its phosphorylation state. Principle of the method A monoclonal capture antibody specific for AKT (Total) has been coated onto the wells of 96-well plate. During the first incubation, standards of known content and unknown samples are pipetted into the wells and the antigen binds to the immobilized (capture) antibody. After washing, a rabbit antibody specific for the target protein is added to the wells and serves as a detection antibody by binding to the immobilized protein captured during the first incubation. After washing, a HRP labeled anti-rabbit IgG is added. This binds to the detection antibody to complete the four member sandwich. After a third incubation and washing to remove all the unbound enzyme, a substrate solution (TMB) is added, which is acted upon by the bound enzyme to produce color. The intensity of this colored product is directly proportional to the concentration of target protein present in the original specimen and the optical density can be read on a standard microplate reader. Rigorous validation Each manufactured lot of this ELISA kit is quality tested for criteria such as sensitivity, specificity, precision, and lot-to-lot consistency. See manual for more information on validation.

AKT (Proteinkinase B, PKB, RAS-alpha) ist eine 57 kDa-Serin/Threonin-Kinase, die eine wichtige Rolle bei verschiedenen biologischen Reaktionen spielt, wie der Regulation des Metabolismus, des Zellüberlebens und des Wachstums durch Phosphorylierung mehrerer Proteine. AKT wird durch Insulin, PI3K, IGF1 und verschiedene andere Wachstums- und Überlebensfaktoren aktiviert. AKT fördert das Zellüberleben durch Hemmung der Apoptose durch Phosphorylierung und Inaktivierung mehrerer Ziele, einschließlich Gabelkopf-Transkriptionsfaktoren und Caspase-9. Es gibt drei Säugetier-Isoformen von AKT: AKT1 (PKB alpha), AKT2 (PKB beta) und AKT3 (PKB gamma), wobei AKT2 und AKT3 zu ungefähr82 % mit der AKT1-Isoform identisch sind. Jede Isoform hat eine Pleckstrin-Homologie-Domäne (PH), eine Kinase- und eine Carboxy-terminale regulatorische Domäne. AKT wurde ursprünglich aus dem Retrovirus AKT8 geklont und ist ein wichtiger Regulator vieler Signaltransduktionswege. Der AKT-Pathway ist ein Hauptziel in der Krebstherpeutik, da die AKT-Signalstörung in viele Krebsarten vorkommt, einschließlich der Krebssyndrome, die als Phakomatosen bekannt sind.

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