Invitrogen™ ELISA-Kit, human, für CREB (Gesamt)

Beschreibung

Kit is designed to detect and quantify the level of CREB (Total) in fresh or frozen human cell lysates. Cross-reactivity has been observed in mouse cells. The assay recognizes both natural and recombinant CREB (Total), independent of its phosphorylation state. Principle of the method A monoclonal capture antibody specific for CREB (Total) has been coated onto the wells of the 96-well plate. During the first incubation, standards of known content and unknown samples are pipetted into the wells and the antigen binds to the immobilized (capture) antibody. After washing, a rabbit antibody specific for the target protein is added to the wells and serves as a detection antibody by binding to the immobilized protein captured during the first incubation. After washing, a horseradish peroxidase labeled anti-rabbit IgG is added. This binds to the detection antibody to complete the four member sandwich. After a third incubation and washing to remove all the unbound enzyme, a substrate solution (TMB) is added, which is acted upon by the bound enzyme to produce color. The intensity of this colored product is directly proportional to the concentration of target protein present in the original specimen and the optical density can be read on a standard microplate reader. Rigorous validation Each manufactured lot of this ELISA kit is quality tested for criteria such as sensitivity, specificity, precision, and lot-to-lot consistency. See manual for more information on validation.

CREB (Cyclic AMP Response Element Binding Protein) ist ein Basis-/Leucin-Zipper-Transkriptionsfaktor mit 43 kDa, der das zyklische AMP-Responseelement (CRE) bindet und die Transkription als Reaktion auf eine Vielzahl extrazellulärer Signale aktiviert, einschließlich Neurotransmitter, Hormone, Membrandepolarisation sowie Wachstums- und neurotrophische Faktoren. Die Aktivierung von CREB ist von der Phosphorylation von Serin133 abhängig. Die Phosphorylation von CREB erfolgt über p44/42 MAP-Kinase und p90 RSK sowie über p38 MAP-Kinase und MSK1. Obwohl CREB DNA unabhängig von ihrem Phosphorylationszustand bindet, ist nur die phosphorylierte Form als Transkriptionsfaktor kompetent. Das CREB-Bindungsprotein (CBP), ein Transkriptionsaktivator, der direkt mit CREB interagiert, bindet an CREB in der Serinregion 133. CREB ist an verschiedenen zellulären Prozessen beteiligt, darunter die Synchronisation zirkadianer Rhythmusstörungen, die Differenzierung von Fettzellen sowie Lernvermögen und Gedächtnis. Beim Menschen befindet sich das Gen auf dem q-Arm des Chromosoms2. Zu den Erkrankungen, die mit einer CREB-Dysfunktion assoziiert sind, gehören Alzheimer, Histiozytoma und Weichgewebemelanome.

Bestellinformation

Versandbedingung: Nasseis