Macherey-Nagel Bioanalysis™ NucleoSEQ™ Kit

Beschreibung

Nicht integrierte Farbstoffterminatoren wirken sich negativ auf die Analyse der Sequenzierungsergebnisse aus. Ein Übermaß an Farbstoffterminatoren führt zu Farbstofftropfen, was zu einer teilweise unleserlichen Sequenz führt.
NucleoSEQ entfernt nicht integrierte Farbstoffterminatoren. Die nachfolgende Analyse ist von hoher Qualität mit langer Leselänge und minimiertem Hintergrund. NucleoSEQ Säulen sind für die schnelle, effektive und kostengünstige Aufreinigung von Sequenzierungsreaktionen ausgelegt. Die Spin-Säulen sind mit einer trockenen Ausschlussmatrix vorgefüllt, die eine effiziente Entfernung von Farbstoffterminatoren ermöglicht. Das Gelfiltrationsmaterial besteht aus Kugeln mit einheitlichen Poren und trennt Moleküle nach Molekulargewicht. Nach Anwendung der Sequenzierungsreaktion auf die NucleoSEQ-Säule werden die kleinen Farbstoffterminatoren und andere Verunreinigungen, z. B. Salze, Nukleotide, Primer, Spuren organischer Lösungsmittel, in den Poren zurückgehalten, während markierte DNA-Fragmente ausgeschlossen und mit hoher Ausbeute im Durchfluss wiedergewonnen werden. Um eine Langzeitlagerung bei Raumtemperatur zu erreichen, sind die NucleoSEQ-Säulen mit trockenem Filterharz vorgefüllt. Die Matrix kann leicht durch Zugabe von Wasser und anschließender Inkubationszeit (>30 Minuten) hydriert werden. Die hydrierten Säulen sind gebrauchsfertig und können bei 4 °C 14 Tage lang gelagert werden. Ein erster kurzer Zentrifugationsschritt entfernt den verbleibenden Lagerpuffer. Nach dem Laden der Probe auf die Säule und einem zweiten Zentrifugationsschritt werden die zu untersuchenden DNA-Fragmente im Durchfluss wiedergewonnen. Kit-Komponenten: Vorgefüllte NucleoSEQ-Säulen, Sammelröhrchen 2 ml.

• Vorbereitungszeit: 5 min/Vorbereitung (ohne Hydration der Matrix)
• Probenmaterial: 20 μl-Reaktionsmischung für Sequenzierung
• Format: Mini-Spin-Säule

Für die effiziente Entfernung von Farbstoffterminatoren, z. B. BigDye™ Terminatoren, mit praktischen Einzelspin-Säulen, die mit trockener Matrix gefüllt sind.