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Thermo Scientific™ Trypton-Gallen-Agar (dehydratisiert)

Mit diesem Medium können Sie in einem modifizierten Direktplattenverfahren Escherichia coli in Lebensmitteln erkennen und zählen.

Marke:  Thermo Scientific™ CM0595B

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Artikelnummer. 10219912

  • 184.00 € / 500 Gramm
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Beschreibung

Beschreibung

Mit dem Thermo Scientific™ Oxoid™ Trypton-Gallen-Agar (dehydratisiert) können Sie in einem modifizierten Direktplattenverfahren Escherichia coli in Lebensmitteln erkennen und zählen. Das von Anderson und Baird-Parker beschriebene Direktplattenverfahren (DPM) ist eine Modifikation des von Delaney et al.1 beschriebenen Verfahrens. Dieses Verfahren, das für den Nachweis und die Zählung von Escherichia coli in Wasser- und Lebensmittelproben entwickelt wurde, nutzt die Fähigkeit von Escherichia coli, bei 44 °C Indol aus Tryptophan zu produzieren, wenn es auf einer Celluloseacetat-Membran auf Platten mit Trypton-Gallen-Agar kultiviert wird.

Die Gewinnung und Koloniezahlbestimmung von Escherichia coli und Coliformen in Umweltproben oder Lebensmitteln sind wichtige Indikatoren für die Hygiene. Trypton-Gallen-Agar wurde gemäß der Formulierung von Anderson und Baird-Parker2 für den Nachweis und die Zählung von Escherichia coli in Lebensmitteln entwickelt.

Gegenüber älteren Verfahren hat es mehrere Vorteile:

  • Es ist schneller.
  • Es hat weniger Abweichungen.
  • Es ermöglicht eine bessere Rückgewinnung aus gefrorenen Proben.
  • Es erkennt anaerogene und schlecht Laktose-fermentierende Stämme.

Das von Anderson und Baird-Parker beschriebene Direktplattenverfahren (DPM) ist eine Modifikation des von Delaney et al.2 beschriebenen Verfahrens. Dieses Verfahren, das für den Nachweis und die Zählung von Escherichia coli in Wasser- und Lebensmittelproben entwickelt wurde, nutzt die Fähigkeit von Escherichia coli, bei 44 °C Indol aus Tryptophan zu produzieren, wenn es auf einer Celluloseacetat-Membran auf Platten mit Trypton-Gallen-Agar kultiviert wird.

Die Autoren kamen zu dem Schluss, dass die Bildung von Indol ein zuverlässigeres Merkmal sowohl für enterotoxigenische als auch für nicht-enterotoxigenische Stämme von Escherichia coli ist als bei der Laktose-Fermentation. Ewing3 stellte fest, dass nur 90 % der Escherichia-Stämme innerhalb von zwei Tagen Säure aus Laktose produzieren, während 99 % der Stämme Indol produzieren.

Die Internationale Kommission für mikrobiologische Spezifikationen für Lebensmittel (CMSF)4 verglich das MPN-Verfahren (Most Probable Number) und das Direktplattenverfahren (DPM) nach Anderson-Baird-Parker und kam zu dem Schluss, dass das DPM- dem MPN-Verfahren bei der Zählung von Escherichia coli in Rohfleisch wegen der geringeren Abweichungen vorzuziehen sei. Es liefert bessere Rückgewinnungen aus gefrorenen Proben, höhere Schnelligkeit und benötigt kleinere Mengen des erforderlichen Mediums.

Das Direktplattenverfahren zählt sowohl anaerogene als auch Laktose-fermentierende Stämme von Escherichia coli, die beim MPN-Verfahren nicht erkannt werden. Laut Ewing3 machen diese Organismen bis zu 10  % der Escherichia-Stämme aus.

Holbrook et al.5 haben das Direktplattenverfahren für den Nachweis und die Zählung von sublethal geschädigten Zellen von Escherichia coli in gefrorenen, getrockneten, wärmeverarbeiteten oder sauren Lebensmitteln weiter modifiziert. Bei dieser Modifikation wird das Inokulum auf eine Celluloseacetat-Membran auf mineralmodifiziertes Glutamat-Agar aufgetragen und 4 Stunden lang bei 37 °C inkubiert. Der Wiederbelebungsschritt ermöglicht die Reparatur von geschädigten Zellen vor der Übertragung der Membran auf eine Platte mit Trypton-Gallen-Agar.

Es wurde nachgewiesen, dass das Vorhandensein hoher Konzentrationen fermentierbarer Kohlenhydrate die Synthese von Tryptophanase hemmt6 und damit die Indolbildung stoppt. Holbrook et al. haben gezeigt, dass der Wiederbelebungsschritt die hohe Zuckerkonzentration im Inokulum auf ein Niveau reduziert, das die Produktion von Indol durch Escherichia coli nicht beeinträchtigt, wenn es auf Trypton-Gallen-Agar kultiviert wird. Der Wiederbelebungsschritt sollte immer beim Prüfen von Milchprodukten oder anderen Produkten mit hohen Zuckerkonzentrationen durchgeführt werden.

Das von Vracko und Sherris7 beschriebene Indol-Reagenz wurde als das am besten geeignete Reagenz mit der ausgeprägensten Reaktion und Reproduzierbarkeit befunden. Das Reagenz aus 5 % p-Dimethylaminobenzaldehyd in 1N Salzsäure, ist einfach zuzubereiten und leidet nicht, wenn es bei Raumtemperatur drei Monate im Dunkeln aufbewahrt wird.

Alle Indol-positiven Stämme ergeben bei Färbung mit dem Indol-Reagenz gut erkennbare rosafarbene Kolonien; Kolonien, die kein Indol produzieren, sind strohfarben.

Das Wachstum Indol-positiver Organismen außer Escherichia coli wird durch die selektive Wirkung der Gallensalze und die erhöhte Inkubationstemperatur gehemmt.

Die eingefärbten Membranen können durch Trocknen unter direktem Sonnenlicht oder einer fluoreszierenden UV-Lampe mit niedrigem Druck mit einem Filter vom Woods-Typ fixiert werden. Durch das Trocknen wird die Intensität der Farbreaktion verbessert, und diese Membranen können als Referenz aufbewahrt werden.

 

Nicht alle Produkte sind in allen Ländern erhältlich. Weitere Informationen erhalten Sie auf Anfrage.

Remel™ und Oxoid™ Produkte sind jetzt Teil der Marke Thermo Scientific.

Spezifikation

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Trypton-Galle-Agar
Agar
Für 13.7 l Medium
Pulver
500 g
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