Invitrogen™ ERK1/ERK2 (Phospho) [pT202/pY204] ELISA-Kit

Beschreibung

ERK1/2 [pThr202/Tyr204]-ELISA quantifiziert IL-1b in Zelllysaten. Der Assay erkennt ausschließlich natürliche und rekombinante ERK 1/2, wenn er bei Threonin 202 und Tyrosin 204 phosphoryliert wird. Verfahrensprinzip Der Phospho-ERK1/2-Sandwich-ELISA (Enzym-Linked Immunosorbent Assay) misst die Menge des Zieles, das zwischen einem zusammenpassenden Antikörperpaar gebunden ist. Ein zielspezifischer Antikörper wurde in den Wells der mitgelieferten Mikrotiterplatte vorbeschichtet. Proben, Standards oder Kontrollen werden dann in diese Wells gegeben und binden an den immobilisierten Antikörper (Capture). Das Sandwich entsteht durch Zugabe des zweiten Antikörpers (Detektor), dann wird eine Substratlösung hinzugefügt, die mit dem Enzym-Antikörper-Zielkomplex reagiert und ein messbares Signal erzeugt. Die Intensität dieses Signals ist direkt proportional zur Konzentration des in der Originalprobe vorhandenen Ziels. Strenge Validierung Jede hergestellte Charge dieses ELISA-Kits ist auf Kriterien wie Empfindlichkeit, Spezifität, Präzision und Chargenkonsistenz geprüft. Weitere Informationen zur Validierung werden in der Bedienungsanleitung angegeben.

ERK1 und ERK2 (extrazelluläre signalregulierte Kinase1 und 2) sind stark an der Regulation von Meiose, Mitose und postmitotischen Funktionen in Zellen beteiligt. ERK1 und ERK2 sind Mitglieder der MAP-Kinase-Familie, die Teil einer Signalkaskade sind, die verschiedene zelluläre Prozesse wie Proliferation, Differenzierung und Zellzyklus-Progression als Reaktion auf zahlreiche extrazellulärer Signale reguliert. Verschiedene Reize, einschließlich Wachstumsfaktoren, Zytokine, Virusinfektionen, Liganden für heterotrimere Guaninnukleotid-bindende Protein (G-Protein)-gekoppelte Rezeptoren und Transformationsfaktoren, aktivieren die ERK1- und ERK2-Signalwege. Außerdem aktivieren Wachstumsfaktoren, die an Tyrosinkinase-Rezeptoren binden, die Aktivierung von Ras/Raf und die Stimulation von Serin/Threonin-Proteinkinasen die ERK1/ERK2-Signalwege. ERK-Proteine werden durch zweifache Phosphorylierung an Tyrosin 204 und 187 sowie an Threonin 177 und 160 innerhalb eines charakteristischen Thr-Glu-Tyr Motivs reguliert. Zur vollständigen enzymatischen Aktivierung müssen ERK1 an Threonin 202 und Tyrosin 204 bzw. ERK2 an Threonin 185 und Tyrosin 187 phosphoryliert werden. Zu den strukturellen Folgen der zweifachen Phosphorylierung von ERK2 gehören der Verschluss des aktiven Zentrums, die Ausrichtung der wichtigsten mit ATP interagierenden katalytischen Reste und die Umgestaltung der Aktivierungsschleife. Als Reaktion auf die Aktivierung phosphorylieren MAP-Kinasen nachgeschaltete Komponenten an Serin und Threonin. Die ERK-Familie hat drei weitere Mitglieder: ERK3, ERK5 und ERK6.