Thermo Scientific™ Thermo Scientific™ iodoTMT Isobaric Label Reagents and Kits

Iodoacetyl-Tandem-Mass-Tag-Reagenzien ermöglichen die selektive Markierung von Cystein-haltigen Peptiden für die Multiplex-Quantifizierung von Proben mithilfe der LC-MS/MS-Analyse. Ähnlich wie Iodoacetamid reagieren iodoTMT-Reagenzien spezifisch mit reduzierten Cystein (Cys) in Peptiden und Proteinen und ermöglichen die Quantifizierung der relativen Abundanz von Cystein-Modifikationen, wie S-Nitrosylation und die Oxidation von Disulfid-Bindungen. iodoTMT-Reagenzien markieren freie Sulfhydrylgruppen auf Cystein-Rückständen irreversibel, im Gegensatz zu früheren reversiblen Cystein-reaktiven TMT-Reagenzien (CysTMT).

Um die mit Cystein markierten Peptide selektiv zu analysieren, kann die Probe mit immobilisiertem Anti-TMT-Antikörper-Harz (Best.- Nr. 90076) und TMT-Elutionspuffer (Best.- Nr. 90104) angereichert werden. Dieser Ansatz der selektiven Thiol-Markierung und Affinitätsanreicherung ähnelt dem isotopencodierten Affinitäts-Tag (ICAT-Verfahren), ermöglicht jedoch die Affinitätsanreicherung mit einer nicht-biologischen Markierung und eine höhere Multiplex-Quantifizierung.

Merkmale von iodoTMT-Reagenzien
• Spezifisch: Reagiert ausschließlich mit Sulfhydrylgruppen (reduzierte, nicht modifizierte Cystein-Rückstände)
• Irreversibel: Die markierten Proteine und Peptide sind nicht anfällig für Reduktionsmittel
• Flexibel: Optionen für die Quantifizierung der Duplex-Isotope (MS) oder der Sixplex-Isobarie (MS/MS)
• Vielseitig: Kann zur Untersuchung von Cystein-Modifikationen eingesetzt werden (z. B. di-Sulfidbrücken, S-Nitrosylation)