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Beschreibung
Isolieren Sie chromatin-gebundene DNA effizient durch Immunpräzipitation (Chromatin IP) für die anschließende Quantifizierung durch PCR mit dem Thermo Scientific™ Pierce Magnetic ChIP Kit.
Weiterführende Informationen und Onlinebestellung
Besondere Merkmale:
� Gereinigte DNA für die quantitative PCR in ungefähr 8 h
Effizient und reproduzierbar – Starke Optimierung des Mikrokokken-Verdaus und der Kernlyse
Empfindlich – Ergebnisse mit nur 10.000 Zellen (1 x 104)
Wenig Hintergrund – Pierce Protein A/G Magnetic Beads wurden in einem Reagenz ohne DNA blockiert, um den Hintergrund niedrig zu halten
Vollständig – Optimierte Reagenzien für die Positivkontrolle sind im Lieferumfang enthalten: RNA Polymerase II-Antikörper und GAPDH-Promotor-PCR-Primer
Enthält:
Kit enthält Reagenzien für die Chromatin-Aufarbeitung, IP und DNA-Aufreinigung sowie Positivkontrollen (Antikörper und Primer)
Erforderlich:
In vivo-Crosslinker (wie Formaldehyd), Ultraschallprozessor mit Mikrospitze (wie Misonix™ Sonicator 3000), für ChIP geeignete Antikörper der Wahl, PCR-Primer für DNA-Zielsequenz, PCR-Stammmischung (mit Farbstoff wie SYBR™ Green im Falle von qPCR) und ein qPCR-Gerät
Empfohlen für:
- Bestimmen Sie die Orte spezifischer Protein-DNA-Interaktionen auf genomischer DNA durch PCR oder ChIP-Seq
- Überwachen Sie die Auswirkungen von Histon-Modifikationen oder chemischen Substanzen auf die DNA-Bindung
Spezifikation
Spezifikation
| Kapazität (metrisch) | 4 × 10^6 Zellen pro Reaktion |
| Beschreibung | Pierce Magnetic ChIP Kit |
| Kitinhalt | 4 x 10^6 Zellen pro Reaktion |
| Inhalt und Lagerung | • Glycin-Lösung (10x), 15 ml; bei Raumtemperatur lagern • PBS (20x), 15 ml; bei 4 °C lagern • Halt™ Protease and Phosphatase Inhibitor Cocktail, EDTA-frei (100x), 1 ml; bei 4 °C • Membran-Extraktionspuffer, 10 ml; bei 4 °C lagern • MNase Verdauungspuffer, 10 ml; bei 4 °C lagern • DTT (7,7 mg), lyophilisiert, 2 Fläschchen; bei Raumtemperatur oder 4 °C lagern • MNase Stopperlösung, 1 ml; bei 4 °C lagern• ChIP-Grade Protein A/G Magnetbeads, 0,7 ml; bei 4 °C lagern • IP-Verdünnungs-/Waschpuffer (5x), 40 ml, bei 4 °C lagern • Natriumchlorid (5 Mol), 6 ml lagern; bei 4 °C lagern• IP-Elutionspuffer (2x), 4,5 ml; bei 4 °C lagern • Mikrozentrifugenröhrchen, 1,5 ml, 75 Röhrchen; Lagerung bei Raumtemperatur oder 4 °C lagern • DNA-Aufbereitungssäule und Reagenzien, 40 Aufreinigungen; Lagerung bei Raumtemperatur oder 4 °C • DNA-Clean-Up-Säule, 40 Säulen • DNA-Säulenbindungslösung, 30 ml • DNA-Säulenwaschlösung, 6 ml • pH-Indikator, 0,8 ml • DNA Säulenelutionslösung, 5 ml • Mikrococcus-Nuclease (ChIP-Klasse) (10 E/µl), 50 µl; bei -20 °C lagern• Anti-RNA-Polymerase-II-Antikörper, 25 µl; bei -20 °C lagern• normale Kaninchen-IgG (1 mg/ml), 10 µl; bei -20 °C lagern • Proteinase K (20 mg/ml), 0,25 ml; bei -20 °C lagern• ChIP-Positivkontrollprimer (GAPDH Promotor, speziell für den Menschen), 100 µl; bei -20 °C lagern |
| Produktlinie | Pierce |
| Menge | 1 Kit |
| Typ | Magnetic Bead ChIP-Kit |
| Ausreichend für | 30 Reaktionen |
| Format | Kit |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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