Macherey-Nagel™ Lysepuffer RA1

Zellen werden durch Inkubation in einer Lösung mit chaotropen Ionen lysiert. Dieser Lysepuffer inaktiviert RNasen, was geeignete Bindungsbedingungen schafft, die die Adsorption von RNA an die Silikamembran begünstigen. Nach der Lyse werden Homogenisierung und Viskositätsreduzierung durch Filtration mit NucleoSpin™ Filtereinheiten. An die Membran gebundene kontaminierende DNA wird durch eine DNase I-Lösung beseitigt, die während der Vorbereitung direkt auf die Membran aufgebracht wird. Optimale Bedingungen für DNase werden erreicht, indem die Membran vor der Behandlung mit einem spezifischen Entsalzungspuffer gewaschen wird. Salze, Metaboliten und makromolekulare zelluläre Komponenten werden durch einfaches Waschen mit zwei verschiedenen Puffern entfernt. Die Gesamt-RNA wird schließlich mit RNase-freiem Wasser eluiert. Der NucleoSpin™ Das RNA Plant Kit enthält zwei alternative Lysepuffer: In den meisten Fällen wird für die Lyse die Verwendung des Puffers RA1 aufgrund seiner stark denaturierenden Eigenschaften empfohlen. Das Vorhandensein abnormer Metaboliten in einer Vielzahl von pflanzlichen Geweben oder Pilzen kann Lysatverfestigung verursachen, was zu einer nicht weiterverarbeitbarer Aufschlämmung führt. In solchen Fällen ist RAP der alternative Puffer der Wahl. Zur gründlichen Homogenisierung und Reduzierung der Lysatviskosität, NucleoSpin™ Es werden auch Filtereinheiten bereitgestellt. Kit-Bestandteile: NucleoSpin™ RNA-Säulen mit 2-ml-Auffangröhrchen, 2-ml-Auffangröhrchen, 1,5-ml-Mikrozentrifugenröhrchen, NucleoSpin™ Filter, Puffer, RNase-freie DNase I, DNase-I-Reaktionspuffer, RNase-freies Wasser.

• Silika-Membran-Technologie
• Ausbeute: μ3 g bis μ70 g aus 100 μg Pflanzenmaterial
• Probenmaterial: 1 mg bis 100 mg Gewebe
• Elutionsvolumen: 60 μl
• Fragmentgröße: 200 Byte bis 20 KB
• Bindekapazität: 200 μg
• Zubereitungszeit: 30 Min./6 Portionen
• Format: Mini-Spin-Säule
• DNase I im Lieferumfang
• NucleoSpin Filtersäulen für die Homogenisierung von Lysat und die Viskositätsreduzierung im Lieferumfang enthalten
• Die parallele DNA-Reinigung ist durch die Verwendung des NucleoSpin RNA/DNA-Puffersatzes möglich. NucleoSpin™ RNA Plant wurde zur Isolierung von DNA-free Hochwertige RNA aus einer Vielzahl von Pflanzen- und Pilzproben.