Learn More
Thermo Scientific™ SILAC Protein Quantitation Kit (Trypsin), RPMI 1640
Thermo Scientific SILAC-Kits zur Proteinquantifizierung (Trypsin), RPMI 1640, wird für die spezifische Analyse der Proteinexpression mittels Massenspektrometrie verwendet, bei der stabile Isotope durch Aminosäuren in einer Zellkultur markiert werden (SILAC).
Marke: Thermo Scientific™ A33973
Beschreibung
Merkmale des SILAC-Proteinquantifizierungskits, RPMI 1640:
• Effizient – bis zu 100 % Markierungsintegration in Proteine lebender Zellen
• Reproduzierbar – minimiert intra-experimentelle Variabilität durch unterschiedliche Probenvorbereitung
• Flexibel – vollständigere Proteomabdeckung durch doppelte Aminosäure-Isotopenmarkierung dank an L-Lysin und L-Arginin armer Medien
•Kompatibel – Markierung von in zahlreichen Säugetierzellen exprimierten Proteinen, die für ein Wachstum im RPMI-1640-Medium angepasst wurden, inkl. HeLa, 293T, COS7, U2OS, A549, A431, HepG2, NIH 3T3, Jurkat und andere
• Hochwertige Supplemente – schwere Aminosäuren mit >99 % Isotopenreinheit; Sterilität, Endotoxin-Freiheit und Zellkultur-Kompatibilität gewährleistet durch dialysiertes FBS
Anwendungen des SILAC Proteinquantifizierungskits:
• Quantitative Analyse der relativen Veränderungen der Proteinabundanz bei verschiedenen Zellbehandlungen
• Quantitative Analyse von Proteinen, für die keine Antikörper verfügbar sind
• Proteinexpressions-Profiling zur Untersuchung normaler vs. kranker Zellen
• Identifizierung und Quantifizierung von Hunderten bis Tausenden von Proteinen in einem einzigen Experiment
SILAC ist eine leistungsstarke Methode zur Identifizierung und Quantifizierung relativer differenzieller Veränderungen in komplexen Proteinproben. Dieser Ansatz umfasst die In-vivo-metabolische Integration von „schweren“ 13C- oder 15N-markierten Aminosäuren in Proteine, gefolgt von der Massenspektrometrie (MS) zur beschleunigten und umfassenden Identifizierung, Charakterisierung und Quantifizierung von Proteinen.
Da Peptide, die mit schweren und leichten Aminosäuren gekennzeichnet sind, chemisch identisch sind, koeluieren sie während der Umkehrphase der Säulenvorfraktionierung und werden daher während der MS-Analyse gleichzeitig erkannt. Die relativen Spitzenintensitäten mehrerer isotopisch unterschiedlicher Peptide aus jedem Protein werden dann verwendet, um die durchschnittliche Änderung der Proteinreichität in der behandelten Probe zu bestimmen.
Trypsin SILAC-Kits werden mit 13C6 15sub2< L-Lysin-2HCl und 13C6 15N4 L-Arginin-HCl geliefert, um lysinhaltige und argininhaltige Peptide aus Trypsin-Proteinverdau zu kennzeichnen und zu quantifizieren. Jedes Kit enthält außerdem 2 x 500 ml Medium und dialysiertes Serum. In Kombination mit Thermo Scientific Protein-/Peptid-Probenanreicherungsprodukten ermöglichen SILAC Proteinquantifizierungskits auch die MS-Analyse niedrig-abundanter Proteine, wie Zelloberflächenproteine, organellspezifische Proteine und post-translationale Proteinmodifikationen wie Phosphorylation oder Glykosylierung.
Spezifikation
SILAC-Kit zur Proteinquantifizierung | |
Massenisotope von Aminosäuren | |
Protein | |
1 kit |
• RPMI 1640 Medium für SILAC, 2 x 500 ml • 13C6 15N2 L-Lysin-2 HCl, 1 x 50 mg • 13C6 15N4 L-Arginin HCl, 1 x 50 mg • L-Lysin-2 HCl, 1 x 50 mg • L-Arginin-HCl, 1 x 50 mg, bei 4 °C • 100 ml FBS lagern, lagern (bei -20 °C ) |
|
Zugelassen für den Versand auf Nass- oder Trockeneis | |
Kit |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.