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LanthaScreen™ LanthaScreen™ TR-FRET Glucocorticoid Receptor Coactivator Assay Kit
Beschreibung
- Das LanthaScreen™ TR-FRET-Coaktivator-Assay-Kit für den Glucocorticoid-Rezeptor bietet eine empfindliche und zuverlässige Methode für das Hochdurchsatz-Screening potenzieller Glucocorticoid-Rezeptor (GR)-Liganden als Agonisten oder Antagonisten der ligandenabhängigen Coaktivator-Rekrutierung. Das Kit verwendet eine humane rekombinanter GR-Ligandenbindungsdomäne (GR-LBD), die mit Glutathion-S-Transferase (GST) (auch separat erhältlich), einem mit mit Terbium (Tb) markierten Anti-GST-Antikörper und einem mit Fluorescein markierten Coaktivator-Peptid in einem homogenen Mix-and-Read-Assayformat markiert ist.
- Agonisten-Modus – Wenn der LanthaScreen TR-FRET Glucocorticoid-Rezeptor-Koaktivator-Assay im Agonisten-Modus läuft (zum Nachweis von Agonistenverbindungen), wird zunächst GR-LBD und dann ein Gemisch aus Fluorescein-Koaktivator-Peptid und Tb-Anti-GST-Antikörper zu Liganden-Testverbindungen hinzugegeben. Nach einer Inkubation bei Raumtemperatur wird das 520 nm/495 nm-TR-FRET-Verhältnis berechnet, welches dann zur Bestimmung von EC50 aus einer Dosisreaktionskurve der Verbindung verwendet werden kann. Basierend auf der Biologie der GR-Koaktivatorpeptid-Interaktion ist die EC50 dieses Liganden ein zusammengesetzter Wert für die Menge des Liganden, die zur Bindung an den Rezeptor, für eine Konformationsänderung und die Rekrutierung des Koaktivatorpeptids erforderlich ist.
- Agonisten-Modus – Wenn der LanthaScreen TR-FRET Glucocorticoid-Rezeptor-Koaktivator-Assay im Agonisten-Modus läuft (zum Nachweis von Agonistenverbindungen), wird zunächst GR-LBD und dann ein Gemisch aus Agonist, Fluorescein-Koaktivator-Peptid und Tb-Anti-GST-Antikörper zu Liganden-Testverbindungen hinzugegeben. Die in diesem Modus verwendete Konzentration von Agonisten ist die EC80-Konzentration, die durch die erste Ausführung des Assays im Agonisten-Modus bestimmt wurde.
- Lieferumfang:
- 1 Röhrchen GR Ligandenbindungsdomäne Rekombinantes Protein (Lagerung bei -68 bis -85 °C)
- 1 Peptid-Röhrchen (bei -5 bis -30 °C lagern)
- 2 TR-FRET Puffer-Flaschen (Lagerung bei -5 bis -30 °C)
- 1 Tb-Anti-GST Ab-Fläschchen (Lagerung bei -5 bis -30 °C)
- 1 DTT-Röhrchen (bei -5 bis -30 °C lagern)
Spezifikation
Spezifikation
| Inhalt und Lagerung | 1 Röhrchen rekombinantes Protein mit GR-Ligandenbindungsdomäne (bei -68 bis -85 °C lagern) 1 Röhrchen mit Peptid (bei -5 bis -30 °C lagern) 2 Flaschen TR-FRET-Puffer (bei -5 bis -30 °C lagern) 1 Fläschchen Tb-Anti-GST Ab (bei -5 bis -30 °C lagern) 1 Röhrchen mit DTT (bei -5 bis -30 °C lagern) |
| Zur Verwendung mit (Anwendung) | Assay für Interaktionen mit Kofaktoren, Kernrezeptorassay |
| Produktlinie | LanthaScreen |
| Menge | 800 x 20 μL Assays |
| Typ | TR-FRET Glucocorticoid Rezeptor-Coaktivator-Assay-Kit |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
Name des Produkts
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