Auswahl von Zytokinen für Konsistenz: Eine Fallstudie zu FGF-Basic für die Verwendung mit pluripotenten Stammzellen, von der Forschung bis zur Herstellung
Zytokine, einschließlich Wachstumsfaktoren, spielen eine wichtige Rolle in der Stammzellenforschung sowie in der Entwicklung und Herstellung von Zelltherapien. Ihre Funktion als interzelluläre und intrazelluläre Signalmoleküle ist entscheidend für die Vermehrung und Differenzierung einer Vielzahl von Stamm- und Immunzellen wie T-Zellen, NK-Zellen und aus iPSC gewonnenen Stammzellen.
Die Produkte von Gibco™ PeproTech™ umfassen eine Reihe von humanen rekombinanten Proteinen, die eine konsistente Leistung hinsichtlich Bioaktivität und Reinheit bieten. Je nach Ihrer Laboranwendung können Sie zwischen RUO (nur für Forschungszwecke) oder AOF (frei von tierischen Bestandteilen) für Forschungs- und Entwicklungszwecke wählen und dann GMP-Zytokine für die präklinische und klinische Herstellung bei der Kommerzialisierung von Therapeutika in Betracht ziehen.
Fallstudie zu Fibroblasten-Wachstumsfaktor-Basic (FGF-b) zur Verwendung mit induzierten pluripotenten Stammzellen (iPSCs)
Pluripotente Stammzellen (PSCs) können sich unbegrenzt selbst erneuern und behalten das Potenzial, sich in Zellen der drei Keimlinien zu differenzieren: Ektoderm, Mesoderm und Endoderm [1]. Die Verwendung von PSCs reicht von der Grundlagenforschung bis hin zu klinischen Anwendungen und stützt sich zunehmend auf serumfreie und feederzellfreie Kulturbedingungen, die von einer Vielzahl rekombinanter Proteine abhängen. Es ist von entscheidender Bedeutung, dass diese Proteine während des gesamten Prozesses, von der Forschung bis zur klinischen Anwendung, eine konstante Leistung erbringen, um zuverlässige und reproduzierbare Ergebnisse zu gewährleisten [2]. Der basische Fibroblasten-Wachstumsfaktor (bFGF oder FGF-basic), auch bekannt als Fibroblasten-Wachstumsfaktor 2 (FGF2), ist eines der wichtigsten rekombinanten Proteine, die in der Stammzellkultur verwendet werden. Er spielt eine entscheidende Rolle bei der Aufrechterhaltung der Pluripotenz und Selbsterneuerung, indem er Signalwege wie PI3K/AKT, PLCγ und MEK/ERK aktiviert [3,4].
Die Gewährleistung einer konsistenten, hochwertigen bFGF-Leistung ist für zuverlässige Ergebnisse in allen Stammzellkultur-Workflows von entscheidender Bedeutung. Die mangelnde Klarheit hinsichtlich der funktionalen Äquivalenz verschiedener bFGF-Qualitäten stellt jedoch eine Herausforderung für Forscher dar, die von der Forschung zur klinischen Anwendung übergehen. Diese Studie befasst sich mit dieser Lücke, indem sie drei bFGF-Produkte von PeproTech bewertet:
- RUO bFGF: Gibco™ Human FGF-Basic (FGF-2/bFGF) (154 aa) Recombinant Protein, PeproTech™ (Produktcode: 17851163)
- AOF bFGF: Gibco™ Human FGF-Basic (FGF-2/bFGF) (154 aa) Animal-Free Recombinant Protein, PeproTech™ (Produktcode: 17893543)
- PeproGMP bFGF: Gibco™ PeproGMP™ Human FGF-Basic (FGF-2/bFGF) Recombinant Protein, PeproTech™ (Produktcode: 30275723)
Hier bewerten und demonstrieren wir die Konsistenz der drei FGF-b-Qualitäten, indem wir ihre Auswirkungen auf das Wachstum und die Pluripotenz von aus menschlichen Hautfibroblasten gewonnenen iPS-Zellen messen. Diese Zellen wurden zunächst über mehrere Passagen in Basalmedium, ergänzt mit einer der drei FGF-b-Qualitäten, vermehrt, wobei die Wachstumsrate und Morphologie (Abbildung 1) beobachtet wurden. Nach der Vermehrung wurde ihre Expression von Pluripotenzmarkern gemessen (Abbildung 2).
Die funktionale Äquivalenz der drei FGF-b-Qualitäten unterstreicht ihre Fähigkeit, sich in verschiedene Phasen der Stammzellenforschung, Prozessentwicklung und klinischen Herstellung zu integrieren. Diese konsistente Leistung der humanen rekombinanten Proteine von PeproTech ermöglicht einen nahtlosen Übergang zwischen den Qualitäten, ohne dass eine umfangreiche Neuvalidierung erforderlich ist, und trägt so zur Gewährleistung der betrieblichen Effizienz bei, während gleichzeitig kosteneffiziente Arbeitsabläufe unterstützt werden (Tabelle 1).
Tabelle 1. Eigenschaften der drei Qualitäten der PeproTech-Zytokine.
Gibco™ PeproTech™-Produkte sind nicht nur für bFGF-Qualitäten, sondern auch für andere rekombinante Zytokine und Wachstumsfaktoren zuverlässig. PeproTech-Produkte sind bekannt für ihre Qualität, Konsistenz und Zuverlässigkeit sowie für ihre Fähigkeit, den Übergang von RUO zu GMP zu unterstützen. Weitere Informationen finden Sie auf der PeproTech-Produktpräsentationsseite.
Referenzen
- Melton D (2014) ‘Stemness’: definitions, criteria, and standards. Essentials of Stem Cell Biology. Academic Press. 7–17.
- Kirkeby A, Main H, Carpenter M (2025) Pluripotent stem-cell-derived therapies in clinical trial: a 2025 update. Cell Stem Cell 32(1):10-37.
- Nakashima Y, Omasa T (2016) What kind of signaling maintains pluripotency and viability in human-induced pluripotent stem cells cultured on laminin-511 with serum-free medium? BioResearch Open Access 5(1):84–93.
- Mossahebi-Mohammadi M et al. (2020) FGF signaling pathway: a key regulator of stem cell pluripotency. Front Cell Develop Biol 8:79.
Weiterführende Links
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