Invitrogen™ Ambion™ In Vivo Factor VII Positive Control siRNA

Ambion™ In-vivo-siRNA-Kontrollen
• Validierte siRNA-Kontrollen zur Optimierung von siRNA-Experimenten, die gegen codierende und nicht codierende Transkripte gerichtet sind
• Positivkontroll-siRNAs, die in verschiedenen, häufig verwendeten Zelllinien auf Funktionalität getestet wurden
• Negativkontrollen mit funktionell bestätigter minimaler Auswirkung auf Zellproliferation und Zellviabilität
• Einschließlich Silencer™ Select-Modifikationen für verbesserte Spezifität oder Ambion™ In-vivo-Modifikationen für verbesserte Stabilität
• Für die Verwendung in Mauszellen

Was sind Ambion™ In-vivo-siRNAs?
Ambion™ In-vivo-siRNAs wurden mit dem bewährten Silencer™ Select-Algorithmus entwickelt und enthalten chemische Modifikationen für eine überragende Serumstabilität bei In-vivo-Abgabe. Die zusätzliche Serumstabilität beeinträchtigt nicht die Leistungsfähigkeit der siRNAs. Ambion™ In-vivo-siRNAs haben sich als nicht toxisch in vivo (Maus) und nicht immunogen (zellbasierte Assays) erwiesen. In zellbasierten Assays weisen Ambion™ In-vivo-siRNAs eine äquivalente oder bessere Potenz auf als Silencer™ Select-siRNAs. Das Ergebnis ist ein besseres Vertrauen in Ihre In-vivo-RNAi-Experimente, ein besserer Knock-down in Kombination mit einer effizienten Darreichungsform und die Gewährleistung begrenzter nicht spezifischer Effekte.

Faktor VII(FVII)-Positivkontroll-siRNA
Ambion™ In-Vivo -Faktor-VII-siRNA, In-Vivo-Ready, bietet eine Positivkontrolle für Experimente mit der Abgabe von Ambion™ In Vivo-siRNA an Mäuse. Faktor VII (FVII⁄F7; auch als Proconvertin bezeichnet) ist eine Vitamin-K-abhängige Serinprotease, die als zentrales Protein in der Koagulationskaskade fungiert. FVII wird in der Leber synthetisiert und in das Plasma abgesondert, wo es als inaktive Form zirkuliert. Nach der Aufnahme von siRNA, die gegen FVII gerichtet ist, in die Leber kann der Knock-down durch Quantifizierung des FVII-Proteingehalts im Blut mittels robuster, handelsüblicher chromogener Assays gemessen werden. Darüber hinaus können Blutproben von demselben Tier zu mehreren Zeitpunkten nach der siRNA-Injektion entnommen werden. Diese Merkmale ermöglichen wesentlich schnellere und effizientere Knock-down-Messungen für FVII als für Genziele, die eine Quantifizierung der mRNA-Spiegel im Lebergewebe erfordern. Dadurch ist FVII eine ideale Kontrolle für die In-vivo-siRNA-Abgabe.

Qualitätskontrolle
Ambion™ synthetisiert und reinigt jede Ambion™ In-Vivo-siRNA in hochmodernen Einrichtungen, um höchste Qualitätsstandards zu erfüllen. Im Rahmen unserer strengen Qualitätskontrolle wird jedes RNA-Oligonukleotid mit MALDI-TOF-Massenspektrometrie analysiert, und die Reinheit wird durch ein analytisches HPLC-System überwacht. Jede gebundene siRNA wird durch Gel-Elektrophorese auf ein korrektes Annealing der Stränge geprüft, um ein Höchstmaß an Qualität zu gewährleisten. Das Ergebnis ist eine hochwertige siRNA, die aufgereinigt und gebrauchsfertig ist.

In-vivo-fähige Kontrollen
Unsere “In-vivo-fähigen” Kontroll-siRNAs unterliegen dieser zusätzlichen Aufreinigung und Teststufe, die für die Einführung von siRNAs in Tiere erforderlich ist. Nach der HPLC-Aufreinigung und der Anlagerung wird jede siRNA mit einem Verfahren weiter gereinigt, das überschüssiges Salz über eine halbdurchlässige Membran entfernt. Das Ergebnis ist eine hochreine siRNA mit minimalem Salzgehalt, die für In-vivo-Anwendungen geeignet ist. In-vivo-siRNAs werden dann steril gefiltert und auf das Vorhandensein von Endotoxin getestet. Bei Konzentrationen von 50 μM in Gegenwart von entionisiertem Wasser enthalten In-vivo-fähige siRNAs unter 5,0 mM Na+, unter 0,06 mM K+ und unter 0,02 mM Mg2+.