Invitrogen™ RNAlater™ Stabilisierungslösung

RNAlater RNA Stabilization Solution stabilisiert und schützt zelluläre RNA in intakten, aufgetauten Gewebeproben. Dadurch entfällt die Notwendigkeit der sofortigen Weiterverarbeitung bzw. des Einfrierens von Gewebeproben in flüssigem Stickstoff für die spätere Weiterverarbeitung. Gewebeteile können gewonnen und in RNAlater RNA Stabilization Solution eingelegt werden. Dies ermöglicht eine Lagerung ohne Gefährdung der Qualität oder der Menge der nach der anschließenden RNA-Isolierung extrahierten RNA. Vorteile der Verwendung von RNAlater RNA Stabilization Solution:

• Wirksamkeit — Stabilisierung von RNA 1 Tag lang bei 37 °C, 1 Woche lang bei 25 °C, 1 Monat lang bei 4 °C oder unbegrenzt lange bei –20 °C
• Einfachheit — ein Reagenz, das RNase sofort deaktiviert und RNA innerhalb von Gewebe und Zellen stabilisiert
• Anwenderfreundlichkeit — Proben müssen nicht in flüssigem Stickstoff gefriergetrocknet oder schnell zurück in den Laborgefrierschrank gebracht werden.
• Mobilität — ideal für die Gewinnung von Gewebe außerhalb des Labors
• Vielseitigkeit — kompatibel mit vielen Verfahren zur RNA-Isolation, einschließlich der meisten RNA-Isolationskits

Anwendungen
RNAlater RNA Stabilization Solution wurde an vielfältigen Säugetiergeweben, Pflanzen, E. coli, Xenopus, Fischen und Drosophila getestet. Ideal für:

• Schutz der RNA-Integrität bei RNase-reichen Geweben
• Entnahme von Proben zu unterschiedlichen Zeitpunkten, ohne dass die Proben zum betreffenden Zeitpunkt sofort verarbeitet werden müssen
• Archivierung von Gewebe für zukünftige Mikrosektionen
• Konservierung tierischer Hohlräume oder Organe zur Stabilisierung der RNA bei längeren Dissektionsverfahren
• Sammeln von Proben an verschiedenen Standorten (z. B. medizinischen Einrichtungen, Standorten außerhalb medizinischer Labore, Space Shuttle), wo RNA nicht sofort isoliert werden kann
• Transport von Proben auf Eis, oder sogar bei Raumtemperatur bei Versand über Nacht

Verfahren mit RNAlater RNA Stabilization Solution
Das sezierte Gewebe (unter 0,5 cm in allen Dimensionen) wird einfach in ca. 5 Volumeneinheiten RNAlater Lösung bei Raumtemperatur eingelegt. Die Lösung durchdringt die Zellen und stabilisiert die RNA. Die Probe kann dann unbegrenzt bei –20 °C (Gewebe gefriert nicht) bis zu einen Monat lang bei 4 °C oder bis zu eine Woche lang bei 25 °C gelagert werden. Für die RNA-Isolierung wird das Gewebe einfach aus der RNAlater Lösung entnommen und so behandelt, als wäre es gerade frisch entnommen worden. Die meisten Gewebe können direkt in einen Lyse-Puffer übertragen und homogenisiert werden. Mit RNAlater Lösung behandelte Proben, die dann eingefroren wurden, können mit Mörser und Stößel zermahlen oder aufgetaut und wie frisches Gewebe verarbeitet werden. Da die RNasen bereits deaktiviert wurden besteht keine Gefahr der Freisetzung von RNasen durch Zellruptur. Zellen können ausgesponnen und dann dem Lysepuffer hinzugefügt werden, oder in einigen Fällen kann RNAlater Lösung zusammen mit den Zellen direkt dem Lysepuffer hinzugefügt werden.

Kompatibel mit einer Vielzahl von Verfahren
RNAlater RNA-Stabilisierungslösung ist kompatibel mit einstufigen RNA-Isolierungsmethoden, wie TRIzol Reagenz, mit Glasbindungsmethoden wie RNeasy von Qiagen oder dem Ambion RNAqueous Kit, mit Säurephenolextraktionsmethoden wie dem Ambion ToTALLY RNA Kit sowie mit Methoden, die Oligo(dT)-Selektion von mRNA verwenden, wie das Ambion Poly(A)Purist Kit. Interne Forschungen sowie vor Kurzem veröffentlichte unabhängige Studien haben gezeigt, dass die Verwendung von RNAlater RNA Stabilization Solution im Vergleich zu anderen Verarbeitungsmethoden für die Probenlagerung keinen Einfluss auf das Ergebnis nachfolgender RNA-Expressionsanalysen hat.