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Beschreibung
Beinhaltet
Wird in einer praktischen 2x-Mischung geliefert, die Folgendes enthält: AmpliTaq Gold™ 360 DNA-Polymerase, MeltDoctor HRM Farbstoff, eine dNTP-Mischung mit dUTP, Magnesiumsalze und anderen Pufferkomponenten, präzise formuliert für optimale HRM-Ergebnisse
Benötigt
Vorlage und Primer
High Resolution Melting (HRM)-Analyse wird nach der PCR als Analysemethode zur Identifizierung der genetischen Variation in Nukleinsäuresequenzen angewendet.Im Gegensatz zu einigen anderen Gemischen erfordert MeltDoctor™ HRM Master Mix keine zusätzliche Mischung vor dem Gebrauch und wurde entwickelt und optimiert ausschließlich für HRM-Anwendungen.
- Geringe Hintergrundfluoreszenz
- Hohe Helligkeit bei doppelsträngiger DNA
- Minimale Temperaturverlagerung des DNA-Meltings aufgrund von Farbstoffanbindung
- Hält PCR-Zyklen dank thermischer Stabilität stand
- Keine Hemmung der Polymeraseaktivität und deshalb hohe PCR-Effizienz
- Eine dNTP-Mischung einschließlich dUTP zur Minimierung von Verschleppungskontaminationen durch Amplikonabbau von Uracil-DNA-Glykosylase (UDG) in nachfolgenden PCR-Reaktionen
Durchführung von Mutations-Scans:
- HRM Analyse kann für Scans nach Mutationen in Zielgenen zur Identifizierung von abweichenden Proben vor der Analyse der Sequenzierung angewendet werden
- Als eine Mutations-Scantechnik bietet HRM erhebliche Vorteile gegenüber konventionellen Methoden, wie die denaturierende Hochdruckflüssigkeits-Chromatographie (DHPLC) und denaturierende Gradienten-Gelelektrophorese (DGGE)
Vorteile von HRM für Mutations-Scans
- Niedriger Reagenzverbrauch mit wenig Abfall: HRM benötigt nur 20 μl PCR-Reaktion für die Analyse jeder Probe, wodurch die Notwendigkeit für HPLC-Lösungsmittel oder DGGE-Gels entfällt
- Einfacher, schneller Arbeitsablauf: Nach der PCR-Amplifikation ist keine zusätzliche Instrumentierung erforderlich. Am Ende des PCR-Profils kann einfach ein hochauflösender Schmelzschritt hinzugefügt werden, um eine sofortige Analyse zu ermöglichen
- Schnelle Optimierung: Im Gegensatz zu DHPLC ist keine thermische Optimierung erforderlich
- Geringer Probenverbrauch: nach der HRM-Analyse kann das PCR-Produkt direkt in einer Sanger-Sequenzierungsreaktion verwendet werden
Hochwertige Komponenten- Magnesiumsalze und andere Pufferkomponenten, exakt formuliert zur Erzielung optimaler HRM-Ergebnisse
- AmpliTaq Gold™ 360 DNA-Polymerase, eine hochgereinigte DNA-Polymerase, die für den sofortigen Hot-Start und eine Probenvorbereitung bei Raumtemperatur entwickelt wurde und nicht-spezifische Produkte minimiert
- MeltDoctor™ HRM Farbstoff, eine stabilisierte Form des fluoreszierenden SYTO™ 9 doppelsträngigen Nukleinsäure-Farbstoffs, entwickelt von Molecular Probes
Bestellinformation
Die garantierte Mindesthaltbarkeit beträgt 60 Tage. Versandbedingungen: Nasses Eis
Spezifikation
Spezifikation
| Inhalt und Lagerung | Zu den Komponenten des MeltDoctor™ HRM Master Mix, die in einem praktischen 2 x-Gemisch geliefert werden, gehören: AmpliTaq Gold™ 360 DNA-Polymerase, MeltDoctor*trade; HRM Dye, eine dNTP-Mischung, die dUTP, Magnesiumsalze und andere Pufferkomponenten enthält, präzise formuliert, um optimale HRM-Ergebnisse zu erzielen. Bei -15 °C bis -25 °C lagern Die garantierte Mindesthaltbarkeit beträgt 60 Tage (exaktes Verfallsdatum auf Produkt und COFA). |
| Nachweisverfahren | HRM |
| Form | Flüssig |
| GC-Rich PCR Performance | Hoch |
| PCR-Methode | qPCR |
| Polymerase | AmpliTaq Gold 360 DNA-Polymerase |
| Reaktionsgeschwindigkeit | Schnell |
| Verfahren | Hochauflösende Schmelzkurvenanalyse (HRM), Mutations-Scans |
| Zur Verwendung mit (Geräte) | 7500 Fast System, 7900HT Fast System, QuantStudio™ 12k Flex, QuantStudio™ 3, QuantStudio™ 5, QuantStudio™ 6 Flex, QuantStudio™ 7, StepOne™, StepOnePlus™, ViiA™ 7 System |
| Genotypisierungsziel | SNPs (Unbekannt oder Zahlreich), epigenetische Targets |
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Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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