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Invitrogen™ Dynabeads™ mRNA DIRECT™ Reinigungskit
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Menge:
5 ml
10 ml
Packungsgröße:
1 Stück
Beschreibung
Das Dynabeads™ mRNA DIRECT™ Kit dient für die einfache und schnelle Trennung reiner, intakter polyadenylierter (polyA) mRNA direkt aus dem Rohlysat tierischer und pflanzlicher Zellen und Gewebe. Die isolierte mRNA eignet sich für alle Folgeanwendungen. Vorteile des Dynabeads™ mRNA DIRECT™ Kits:
Schnell — ein 15-minütiges Verfahren ergibt reine, intakte mRNA
Hochreine mRNA-Isolation — die beste Wahl vor der cDNA-Synthese
Empfindliche mRNA-Isolation—ermöglicht die cDNA-Synthese und die cDNA-Bibliothekserstellung aus ultrakleinen Startproben (ermöglicht den Aufbau einer cDNA-Bibliothek aus einer einzelnen Zelle)
Systemübersicht
Das Isolationsprotokoll basiert auf der Basenpaarung zwischen den PolyA-Rückständen am 3'-Ende der meisten mRNA und den Oligo (dT)25-Rückständen, die kovalent an die Oberfläche der Dynabeads™ gekoppelt sind. Andere RNA-Arten ohne polyA-Schwanz hybridisieren nicht an den Perlen und werden problemlos ausgewaschen. Ribosomale RNA, DNA, Proteine und kleine RNA-Moleküle (z. B. Transfer RNA, Mikro-RNA und kleine nukleoläre RNA) binden nicht an die Beads und werden verworfen. RNase-Hemmstoffe im Lyse-/Anbindungs-Puffer zusammen mit strengen Hybridisierungs- und Waschbedingungen gewährleisten die Trennung reiner, intakter mRNA aus RNase-reichen Rohproben ohne Verwendung stark chaotropischer Wirkstoffe. Die mRNA-Aufreinigungs-Beads erfassen spezifisch mRNA-Transkriptome aus einer Vielzahl an Rohausgangsproben (siehe Protokoll). 1 mg Dynabeads™ Oligo (dT)25-Perlen (200 μl) bindet bis zu 2 μg mRNA. tEine typische Säugetierzelle enthält etwa 10–30 pg Gesamt-RNA; davon sind 1 – 5 % mRNA.
Systemübersicht
Das Isolationsprotokoll basiert auf der Basenpaarung zwischen den PolyA-Rückständen am 3'-Ende der meisten mRNA und den Oligo (dT)25-Rückständen, die kovalent an die Oberfläche der Dynabeads™ gekoppelt sind. Andere RNA-Arten ohne polyA-Schwanz hybridisieren nicht an den Perlen und werden problemlos ausgewaschen. Ribosomale RNA, DNA, Proteine und kleine RNA-Moleküle (z. B. Transfer RNA, Mikro-RNA und kleine nukleoläre RNA) binden nicht an die Beads und werden verworfen. RNase-Hemmstoffe im Lyse-/Anbindungs-Puffer zusammen mit strengen Hybridisierungs- und Waschbedingungen gewährleisten die Trennung reiner, intakter mRNA aus RNase-reichen Rohproben ohne Verwendung stark chaotropischer Wirkstoffe. Die mRNA-Aufreinigungs-Beads erfassen spezifisch mRNA-Transkriptome aus einer Vielzahl an Rohausgangsproben (siehe Protokoll). 1 mg Dynabeads™ Oligo (dT)25-Perlen (200 μl) bindet bis zu 2 μg mRNA. tEine typische Säugetierzelle enthält etwa 10–30 pg Gesamt-RNA; davon sind 1 – 5 % mRNA.
Spezifikation
Spezifikation
| Inhalt und Lagerung | Enthält: 5 ml Dynabeads Oligo (dT)25 30 ml Lyse/Bindungspuffer 60 ml Waschpuffer A 30 ml Waschpuffer B 15 ml 10 mM Tris-HCl (Elutionspuffer) Enthält genügend Reagenzien für 20 Standard-Isolierungen. Bei 2 bis 8 °C lagern. |
| Isolation Technology | Magnetic Bead |
| Aufreinigungszeit | 15 min |
| Probentyp | Blut, Zellen, FFPE & fixierte Proben, flüssige Proben (z. B. Serum), pflanzliche Proben, RNA, Gewebe, virale Proben, Hefe, Zellen, FFPE und fixierte Proben, flüssige Proben (z. B. Serum), pflanzliche Proben, RNA, Gewebe, virale Proben, Hefe |
| Endprodukttyp | mRNA |
| Hochdurchsatz-Kompatibilität | Kompatibel mit hohem Durchsatz, manuelle Protokolle, automatisierte Protokolle |
| Zur Verwendung mit (Anwendung) | Quantitative Echtzeit-PCR (qPCR), Reverse Transkriptase-PCR (RT-PCR), Erstellung von cDNA-Bibliotheken, Nuklease Protektionsassays, Northern Blotting, Cloning |
| Produktlinie | DYNAL, Dynabeads, mRNA DIRECT |
| Menge | 5 ml |
| Versandbedingung | Raumtemperatur |
| Mehr anzeigen |
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
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