Merck Ultrafree™-DA Zentrifugalfilter

Rückgewinnung von 100 bis 10.000 bp langen DNA-Fragmenten aus Agarose-Gelscheiben durch einen einzigen 10-minütigen Zentrifugationsschritt. Das Kit besteht aus einem vormontierten Filtergerät mit einem Agarose-Gelzerstäuber, einem Mikrozentrifugen-Vial und einem modifizierten TAE-Gel-Extraktionspuffer (trocken). Das Gerät nutzt die Gelkompression zur Extraktion von DNA aus der Agarose. Die Zentrifugalkraft kollabiert die Gelstruktur und treibt die Agarose durch eine kleine Öffnung im Gelzerstäuber. Die daraus resultierende Gel-Suspension wird in den Probenfilterbecher gesprüht. Eine weitere Aufreinigung ist für die meisten Anwendungen nicht erforderlich, einschließlich Klonierung und radioisotopische oder fluoreszierende DNA-Sequenzierung. Da die Agarose-Gelelektrophorese ein hohes Auflösungsvermögen hat, werden kleine und große unspezifische Amplifikationsprodukte, die häufig das Klonen und Sequenzieren nach der PCR stören, vollständig aus dem Produkt entfernt.

• Minimaler manueller Eingriff
• 10-Minütiges Zentrifugieren
• Voll funktionelle DNA

Leistung
Typische DNA-Recoveries aus Agarose-Gels

DNA-Größe (bp)	Prozentsatz DNA-Recoveries
100	78
700	71
1.000/Packung	77
2027	47
4361	35
9416	32
23130	29

Protokoll
1. Schneiden Sie die gewünschte Bande nach der routinemäßigen elektrophoretischen Analyse von PCR-Produkten oder anderer DNA durch ein Agarose-Gel aus.
2. Setzen Sie die Gelscheibe in das vormontierte Gerät ein. Hinweis: Das Protokoll ist nicht mit Agarose mit niedrigem Schmelzpunkt kompatibel.
3. Zentrifugieren Sie 10 Minuten lang bei 5.000 x g, um die Gel-Suspension in den Filterbecher zu extrahieren.
4. Die DNA kann im verschlossenen Filter-Vial aufbewahrt werden und Probenfilterbecher und Gelzerstäuber können entsorgt wurden.