Thermo Scientific™ Biotin Chromogenic Detection Kit

Das Kit wurde dafür konzipiert, reproduzierbar eine hohe Empfindlichkeit mit schwachem Hintergrund in Anwendungen wie zum Beispiel Southern-, Northern-, Dot- und Slot-Blotting sowie Screening von viralen Plaques und Bakterienkolonien zu bieten. Die Biotinilisierung von DNA/RNA-Sonden wird häufig als sichere und komfortable Alternative zur radioaktiven Markierung verwendet. Biotin kann unter Verwendung von verschiedenen enzymatischen oder nichtenzymatischen Methoden einschließlich des Biotin-basierten DecaLabel DNA-Markierungs-Kit in Nukleinsäuren eingebaut werden. Biotinilierte Sonden werden mit an alkalische Phosphatase (AP) gekoppeltem Streptadivin nachgewiesen. Streptavidin-AP-Konjugate binden sich spezifisch und irreversibel an die Biotin-markierten Sonden. Die Sonden werden anschließend unter Verwendung eines chromogenen Substrats für alkalische Phosphatase BCIP/NBT visualisiert, wodurch ein lilablaues Präzipitat erzeugt wird. Für die Visualisierung ist deshalb kein Röntgenfilm oder andere spezielle Ausrüstung erforderlich (Abb. 1). Das chromogene Biotin-Nachweis-Kit umfasst Blocking-Reagenz und Blocking-Waschpuffer, die speziell zur Minimierung von Hintergrund konzipiert wurden, der oft beim Biotin-Nachweis mit herkömmlichen Systemen entsteht. Die positiv geladene SensiBlot Plus Nylonmembran ist eine empfohlene Komponente dieses Nachweis-Kits, da es die höchstmögliche Nachweisempfindlichkeit bei schwächstem Hintergrund gewährleistet.

• Hohe Nachweisempfindlichkeit – 0,03 pg homologe DNA in Dot-Blot-Hybridisierung mit Biotin-markierter Sonde
• Niedriger Hintergrund durch optimierte Wasch- und Blockierverfahren
• Niedriger Hintergrund durch optimierte Wasch- und Blockierverfahren
• Schnell und praktisch – Gebrauchsfertige Komponenten

Empfohlen für:

Southern, Northern, Dot/Slot Blots, Plaque- oder Kolonie-Screening.