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Artikelnummer. 10130790
Marke: Thermo Scientific™ ER1761
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Beschreibung
Lambda-DNA verdaut mit FspBI (BfaI), 0,7 % Agarose, 13 Spaltstellen
Herkömmliche Restriktionsendonukleasen sind eine große Ansammlung hochwertiger Restriktionsenzyme, die für den Einsatz in einem der Puffer des Fünf-Puffer-Systems optimiert sind. Darüber hinaus bietet der universelle Tango Puffer Vorteile bei Doppelverdauungen. Alle Enzyme zeigen unter den empfohlenen Puffer- und Reaktionsbedingungen 100 % Aktivität. Um eine konsistente Enzymleistung zu gewährleisten, enthalten Thermo Scientific Restriktionsenzym-Puffer vorgemischtes BSA, welches die Stabilität zahlreicher Enzyme verbessert und Schadstoffe bindet, die in DNA-Proben enthalten sein können.
Über 80 % der verdauten DNA-Fragmente können ligiert und über 95 % dann erneut in einem Reaktionsgemisch mit 20 bis 40 Units T4 DNA-Ligase/1 μg der Fragmente und 10 % PEG bei einer 5′-Termini-Konzentration von 0,13 μM nach einem 50-fachen Verdau (3 U/μg DNA x 17 h) mit BfuI FspBI (BfaI) geschnitten werden.
5'...C▵T A G...3'
3'...G A T▵C...5'
Bedingungen für 100 % Aktivität:
- 1x Buffer Tango™:33 mM Tris-Acetat (pH 7,9 bei 37°C), 10 mM Mg-Acetat, 66 mM K-Acetat und 0,1 mg/ml BSA
- Bei 37°C inkubieren
Lagerungspuffer:
- FspBI wird geliefert in: 10 mM Tris-HCl (pH 7,4 bei 25°C), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin
Methylierungseffekte:
- Dam: möglicherweise Überlappung — keine Auswirkung
- Dcm: keine Überlappung — keine Auswirkung
- CpG: keine Überlappung — keine Auswirkung
- EcoKI: keine Überlappung — keine Auswirkung
- EcoBI: keine Überlappung — keine Auswirkung
Verdauung von Agarose-eingebetteter DNA:
- Es sind mindestens 10 U der Enzyme für den vollständigen Verdau von 1 μg in Agarose eingebetteter Lambda-DNA in 4 Stunden erforderlich
Hinweis:
Die Spaltung mit FspBI wird durch überlappende dam-Methylierung behindert. Verwenden Sie zur Vermeidung von dam-Methylierung einen dam-, dcm-Stamm wie z. B. GM2163 (Nr. M0099).
Spezifikation
Spezifikation
| Konzentration | 10 U/μl |
| Methylierungsempfindlichkeit | Nicht empfindlich für Dam-Methylierung, Dcm-Methylierung und CpG-Methylierung, Dcm-Methylierung und CpG-Methylierung, Not CpG Methylation-Sensitive |
| Enzym | FspBI (BfaI) |
| Kompatibler Puffer | 10x Puffer Tango |
| Empfindlich gegen Hitzeinaktivierung | Ja |
| Optimale Reaktionstemperatur | 37°C |
| Typ IIS RE | Nein |
| Menge | 500 E |
| Produkttyp | Restriktionsenzym |
| Forschungskategorie | Herkömmliches Klonen |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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