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Beschreibung
Lambda-DNA verdaut mit PstI, 0,7 % Agarose, 28 Spaltstellen
Herkömmliche Restriktionsendonukleasen sind eine große Ansammlung hochwertiger Restriktionsenzyme, die für den Einsatz in einem der Puffer des Fünf-Puffer-Systems optimiert sind. Darüber hinaus bietet der universelle Tango Puffer Vorteile bei Doppelverdauungen. Alle Enzyme zeigen unter den empfohlenen Puffer- und Reaktionsbedingungen 100 % Aktivität. Um eine konsistente Enzymleistung zu gewährleisten, enthalten Thermo Scientific Restriktionsenzym-Puffer vorgemischtes BSA, welches die Stabilität zahlreicher Enzyme verbessert und Schadstoffe bindet, die in DNA-Proben enthalten sein können.
5'..C T G C A▵G...3'
3'..G▵A C G T C...5'
Bedingungen für 100 % Aktivität
- 1x Puffer O:50 mM Tris-HCl (pH 7,5 bei 37°C), 10 mM MgCl2, 100 mM NaCl und 0,1 mg/ml BSA
- Bei 37°C inkubieren
Lagerungspuffer
- PstI wird geliefert in: 10 mM Tris-HCl (pH 7,4 bei 25°C), 200 mM NaCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 0,15% Triton X-100, 0,2 mg/ml BSA und 50 % (v/v) Glycerin
Ligation und erneutes Schneiden
- Nach 50-fachem Verdau mit PstI können über 95 % der DNA-Fragmente ligiert und erneut geschnitten werden
Methylierungseffekte
- Dam: keine Überlappung — keine Auswirkung
- Dcm: keine Überlappung — keine Auswirkung
- CpG: keine Überlappung — keine Auswirkung
- EcoKI: keine Überlappung — keine Auswirkung
- EcoBI: keine Überlappung — keine Auswirkung
Verdauung von Agarose-eingebetteter DNA
- Es sind mindestens 5 Units der Enzyme für den vollständigen Verdau von 1 μg in Agarose eingebetteter Lambda-DNA in 16 Stunden erforderlich
Kompatible Enden
- Alw21I, ApaI, BseSI, Eco24I, Mph1103I, PstI, SacI, SdaI
Hinweis:
Ein hoher pH-Wert, eine geringe Salzkonzentration, hohe Glycerinkonzentration und 8 %DMSO können zu Star-Aktivität führen (Malyguine, E., et al., Gene, 8, 163-177, 1980). Umgebende Sequenzen: Das Vorliegen von angrenzenden G-C-Basenpaaren führt zu einer signifikanten Widerstandsfähigkeit gegenüber Spaltung (Armstrong, K. and Bauer, W.R., NAR, 10, 993-1007, 1982). 100 % Aufnahme von dUTP an der Erkennungsstelle reduziert die PstI-Spaltung auf 25 % (Glenn, T.C., et al., Biotechniques, 17, 1086-1090, 1994). PstI schneidet AGCTGCAG nicht, wenn es durch AluI-Methyltransferase methyliert wurde.
Spezifikation
Spezifikation
| Konzentration | 10 U/μl |
| Methylierungsempfindlichkeit | Nicht empfindlich für Dam-Methylierung, Dcm-Methylierung und CpG-Methylierung, Dcm-Methylierung und CpG-Methylierung, Not CpG Methylation-Sensitive |
| Enzym | Pst I |
| Kompatibler Puffer | 10x Puffer O |
| Empfindlich gegen Hitzeinaktivierung | Nein |
| Optimale Reaktionstemperatur | 37°C |
| Typ IIS RE | Nein |
| Menge | 5 x 3000 E |
| Produkttyp | Restriktionsenzym |
| Forschungskategorie | Herkömmliches Klonen |
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
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