Thermo Scientific™ X-Gal-Lösung, gebrauchsfertig

Beschreibung

Zusammensetzung: C₁₄H₁₅BrClNO₆ Molekulargewicht: 408,6

X-Gal (5-Brom-4-Chlor-3-Indolyl-Beta-D-Galactopyranosid) ist ein inertes chromogenes Substrat für Beta-Galaktosidase, das X-Gal zu einer farblosen Galaktose und 4-Chlor-3-Brom-Indigo hydrolysiert und so ein intensiv blaues Präzipitat bildet. Die Induktion des lacZ-Gens mit IPTG führt zur Hydrolyse von X-Gal und zur Entstehung blauer Kolonien (siehe nachstehende Abbildung).

Die gebrauchsfertige X-Gal-Lösung ist eine stabile, 0,22 µm-Membran-gefilterte Lösung und eignet sich gemeinsam mit IPTG zur unmittelbaren Verwendung beim Blau-Weiß-Kolonie-Screening.

Empfohlen für:

Blau-Weiß-Kolonie-Screening zur Unterscheidung zwischen rekombinanten (weiß) und nicht rekombinanten (blau) Kolonien (1); Visualisierung der Reportergenexpression von Beta-Galaktosidase in transfizierten eukaryotischen Zellen; Nachweis von Beta-Galaktosidase-Aktivität im Rahmen immunologischer und histochemischer Verfahren.

Hinweis:

Die Vorbereitung einer 20 mg/ml-Lagerlösung in Dimethylformamid (DMF) oder Dimethylsulfoxid (DMSO) wird für X-Gal empfohlen. DMF löst einige Kunststoffmaterialien auf. Daher sollte eine direkte Zugabe von DMF-haltiger Lösung in Kunststoff-Petrischalen vermieden werden. DMF ist toxisch. Bevor die Bakterien auf der Agarplatten ausplattiert werden, sollte die Dimethylformamid enthaltende X-Gal-Lösung zuvor vollständig getrocknet werden lassen.