Invitrogen™ ProcartaPlex™ Human Graft versus Host Disease Panel, 8plex

Transplantat-gegen-Wirt-Krankheit (GVHD) kann bei Stammzelltransplantationen auftreten, wenn Immunzellen des Spenders (das Transplantat) den Empfänger (den Wirt) als fremd erkennen und die transplantierten Immunzellen die Körperzellen des Wirtes angreifen. GVHD kann auch nach einer Bluttransfusion auftreten, wenn die verwendeten Blutprodukte nicht bestrahlt oder mit einem zugelassenen Pathogenreduktionssystem behandelt wurden. Daher kann der gleichzeitige Nachweis dieser Ziele dazu beitragen, mehr Informationen über diese Prozesse zu erhalten. Das Panel wird in einem gebrauchsfertigen Format mit einzelnen Fläschchen mit Fänger- und Nachweisreagenzien geliefert, die in 1x-Konzentration formuliert sind und weniger Pipettieren und Experimentieranordnung erfordern. Es ist nicht mit Simplexen oder anderen Panels kombinierbar.

ProcartaPlex vorkonfigurierte Panels werden umfassend auf die Kombinierbarkeit, Interferenz und Kreuzreaktivität von Analyten getestet, um ein Höchstmaß an Validierung und Präzision zu gewährleisten. Alle ProcartaPlex Panels werden mit den erforderlichen Reagenzien für den Assay geliefert.

ProcartaPlex Multiplex-Panels sind in verschiedenen Formaten für sechs Spezies erhältlich (Mensch, Maus, Ratte, nicht menschlicher Primat, Schwein und Hund).

Zielliste [Bead-Region]: CD30 [34], Granzym A [74], HGF [46], IL-2R [22], IL-33R (ST2) [35], KRT18 [67], Syndecan [14], TNF-RI [39]

Über ProcartaPlex-Assays für die Luminex-Plattform

ProcartaPlex Immunassays basieren auf dem Prinzip eines Sandwich-ELISA, bei dem zwei hochspezifische Antikörper, die an unterschiedliche Epitope eines Proteins binden, zur gleichzeitigen Quantifizierung aller Protein-Targets mit einem Luminex-Gerät verwendet werden. ProcartaPlex Multiplex-Assays benötigen nur 25 µl Plasma oder Serum oder 50 µl Zellkulturüberstand und liefern analysierte Ergebnisse in nur vier Stunden.

Die Merkmale beinhalten:

• Reproduzierbare, zuverlässige Ergebnisse – als Panel nach dem höchsten Industriestandard validiert, einschließlich Proteinzielkombinierbarkeit und Kreuzreaktivitätstests
• Mehr Ergebnisse pro Probe – gleichzeitige Messung mehrerer Proteinziele in einer einzigen Probe von 25 bis 50 µl
• Bewährte Luminex Technologie: hoch referenzierte Multiplexing-Plattform zur Proteindetektion und -quantifizierung

Bei ProcartaPlex Assays kommt die Luminex xMAP (Multianalyt-Profiling) Technologie für die gleichzeitige Detektion und Quantifizierung von bis zu 80 Proteinzielen in einer einzigen 25 bis 50 µl-Probe aus Plasma, Serum, Zellkulturüberständen und anderen Körperflüssigkeiten zum Einsatz.

Die Luminex Beads im ProcartaPlex Assay sind intern mit präzisen Anteilen von roten und Infrarot-Fluorophoren gefärbt, um spektral einzigartige Signaturen zu erzeugen, die von den Luminex xMAP Detektionssystemen (z. B. Luminex 200, FLEXMAP 3D und MAGPIX) identifiziert werden können. Ähnlich wie bei einem Sandwich-ELISA verwendet der ProcartaPlex Assay zusammenpassende Antikörperpaare, um das zu untersuchende Protein zu identifizieren. In einem Multiplex-Assay wird jeder spektral einzigartige Bead mit spezifischen Antikörpern für ein einzelnes Zielprotein markiert, und gebundene Proteine werden mit biotinylierten Antikörpern und Streptavidin–R-Phycoerythrin (RPE) identifiziert. Die Konjugation von Protein-spezifischen Antikörpern an bestimmte Beads ermöglicht die Analyse mehrerer Ziele in einem einzelnen Well.

Der wichtigste Unterschied zwischen einem ProcartaPlex Assay und ELISA besteht darin, dass der Capture-Antikörper im ProcartaPlex Assay mit einem Bead konjugiert ist und nicht per Adsorption am Mikrotiterplatten-Well haftet, weshalb die ProcartaPlex Assay-Reagenzien frei in der Lösung schwimmen. Zum Nachweis verfügt das Luminex 200 Gerät beispielsweise über zwei Laser, einen zur Unterscheidung der spektralen Signatur jedes Beads und den zweiten zur Quantifizierung der RPE-Fluoreszenz, die proportional zur in der Probe vorhandenen Proteinmenge ist. Mit ProcartaPlex Multiplex-Assays können mehr Zielproteine mit deutlich weniger Proben in der gleichen Zeit profiliert werden, die für die Durchführung eines herkömmlichen Sandwich-ELISA benötigt wird.

ProcartaPlex Multiplex-Panels sind in verschiedenen Formaten für sechs Spezies erhältlich (Mensch, Maus, Ratte, nicht menschlicher Primat, Schwein und Hund).