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Invitrogen™ BLOCK-iT™ Lentiviral RNAi Gateway™ Vector Kit
Beschreibung
Beinhaltet
Das BLOCK-iT™ lentivirale RNAi Gateway™ Vektor-Kit enthält den pLenti6/BLOCK-iT™-DEST-Vektor, den pLenti6-GW/U6 -laminshRNA-Kontrollvektor und die One Shot™ Stbl3 kompetenten Zellen. Vektoren werden supergewickelt und lyophilisiert geliefert. Das BLOCK-iT™ lentivirale RNAi Expressions-System enthält das BLOCK-iT™ lentivirale RNAi Gateway™ Vektor-Kit, das BLOCK-iT™ U6 Eingabevektor-Kit, das ViraPower™ Bsd Support Kit, die 293FT-Zelllinie und das LR Clonase™ Enzymgemisch.
Ein neuartiges Klonierungsverfahren setzt ein ca.50 bp-DNA-Oligonukleotid unmittelbar nach einem U6 Pol III Promoter in den BLOCK-iT U6-Eingabevektor. Das Oligonukleotid wurde entwickelt, um RNA zu exprimieren, die eine Haarnadelstruktur bildet, die die Sense- und Antisense-Bereiche Ihres Zielgens enthält. Diese shRNA wird dann in den pLenti6/BLOCK-iT-DEST-Vektor neu kombiniert. Nach viraler Produktion und Transduktion wird die vom U6-Promotor angetriebene shRNA stabil als RNAi-Kassette integriert. Die erzeugte shRNA vermeidet den Wirtsverteidigungsmechanismus und ist effektiv bei der Herstellung der RNAi Gen-Knockdown-Reaktion. Mit dem BLOCK-iT lentiviralen RNAi-Expressionssystem kann eine langfristige Analyse der Genblockierung sowohl in teilenden als auch nicht teilenden Säugetierzelltypen und Tiermodellen erzielt werden.
Das BLOCK-iT RNAi U6 Eingabevektor-Kit ermöglicht das rationalisierte Klonen von shRNA-Zielsequenzen für Tests in transienten Experimenten. Ausgewählte RNAi Expressionskassetten werden über eine Standard-Gateway LR-Rekombinationsreaktion schnell und effizient aus dem BLOCK-iT RNAi U6 Eingabevektor in den pLenti6/BLOCK-iT-DEST-Vektor rekombiniert.
- attR-Stellen für eine effiziente Rekombination mit dem attL-flankierten U6 Gateway™ Eingabevektor, der die RNAi-Kassette enthält
- Alle erforderlichen Komponenten für eine effiziente lentivirale Verpackung und die Abgabe der zu untersuchenden shRNA
- Blasticidin-Auswahlmarker für die schnelle, effiziente Auswahl stabiler Zelllinien, die die shRNA exprimieren
Klonierung, Gateway-Klonierung, lentivirale shRNA und miRNA, RNAi, RNAi, Epigenetik und Non-Coding-RNA-Forschung, virusbasierte RNAi
Spezifikation
Spezifikation
| Produkttyp | RNAi Expressions-Vektorkit |
| Inhalt und Lagerung | Das BLOCK-iT™ lentivirale RNAi Gateway™ Vektor-Kit enthält den pLenti6/BLOCK-iT™-DEST-Vektor, den pLenti6-GW/U6 -laminshRNA-Kontrollvektor und die One Shot¤ Stbl3 kompetenten Zellen. Vektoren werden supergewickelt und lyophilisiert geliefert. Nach der Resuspendierung bei -20 °C lagern. Lagern Sie kompetente Zellen bei -80 °C. Das BLOCK-iT™ Lentivirale RNAi Expressions-System enthält das BLOCK-iT™ Lentivirale RNAi Gateway™ Vektor-Kit, das BLOCK-iT™ U6 Eingabevektor-Kit, das ViraPower™ Bsd Support Kit, die 293FT-Zelllinie und das LR Clonase™ Enzymgemisch. Lagern Sie die Komponenten gemäß den Angaben in den jeweiligen Kits. Lagern Sie das LR Clonase™-Gemisch bei -80 °C. Bei ordnungsgemäßer Lagerung garantiert 6 Monate stabil. |
| Klonierungsmethode | Gateway™ |
| Konstitutives oder induktives System | Konstitutiv |
| Liefertyp | Lentiviral |
| RNAi-Typ | shRNA |
| Selektionsmittel (eukaryotisch) | Blasticidin |
| Vektor | pLenti |
| Promoter | U6 |
| Format | Kit |
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Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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