Learn More
Invitrogen™ GeneRacer™ Kit with SuperScript™ III RT and TOPO TA Cloning™ Kit for Sequencing
Beschreibung
Das GeneRacer Kit bietet eine Methode zur Gewinnung von 5'- und 3'-Enden der cDNA in voller Länge anhand einer bekannten cDNA-Sequenz aus exprimierten Sequenzteilstücken (ESTs), subtrahierter cDNA, Differentialanzeige oder Bibliothekssuche. RACE PCR-Produkte können einfach und schnell kloniert werden: entweder mit dem Zero Blunt TOPO PCR Klonierungskit für die Sequenzierung (stumpfendige PCR-Produkte) oder mit dem TOPO TA Klonierungskit für die Sequenzierung (PCR-Produkte mit 3' A-Überhängen). Anhand der bereitgestellten Protokolle lassen sich die cDNA-Enden von seltenen (30 Kopien/Zelle) und langen (9 KB) Transkripten amplifizieren und ab 1 μg Gesamt-RNA sequenzieren.
- Generierung von cDNA aus Transkripten mit mindestens 10 kb Länge
- Gewinnung des Volllängen-5'-Endes von seltenen Transkripten mit weniger als 30 Kopien pro Zelle
- Klonierung der 5'- und 3'-Enden in voller Länge, um eine vollständige cDNA-Sequenz zu erhalten
Klonierung, PCR und Echtzeit-PCR, Reverse Transkription, cDNA-Bibliotheken und Bibliotheksaufbau
Bestellinformation
Versandbedingung: Trockeneis
Spezifikation
Spezifikation
| Bakterien- oder Hefenstamm | TOP10 |
| Klonierungsmethode | TOPO, TA |
| Inhalt und Lagerung | Jedes Modul wie angegeben lagern: GeneRacer™ Modul (-20 °C): • 2 × 1,5 ml steriles Wasser • 24 µl RNaseOut™ • je 6 µl CIP (Calf Intestinalphosphatase), CIP-Puffer, TAP (Tabak-Säure-Pyrophosphatase), 10X TAP-Puffer, T4-RNA-Ligase, 10X T4-RNA-Ligase-Puffer und 10 mM ATP • 6 × 250 ng GeneRacer™ RNA Oligo • 2 × 1 ml Phenol/Chloroform • 36 µl Muschelglykogen • 200 µl Natriumacetat (3 M) • je 225 µl GeneRacer™ 5′ Primer, 5′ Nested-Primer, 3′ Primer und 3′ Nested-Primer • 20 µl Kontroll-RNA (HeLa Gesamt-RNA, 500 ng/µl) • je 15 µl Kontroll-Primer A und Kontroll-Primer B.1 SuperScript™ III RT Modul (-20 °C) • 6 µl SuperScript™ III Reverse Transkriptase (200 U/µl) • 24 µl 5X Erststrang-Puffer • 15 µl DTT (0,1 M) • 6 µl RNaseH (2 U/µl) • 6 µl Random-Primer (100 ng/µl) • 6 µl GeneRacer™ Oligo dT-Primer (900 ng/µl) • 6 µl dNTP Mix (je 10 mM) 10 S.N.A.P.™ Säulen (Raumtemperatur) TOPO TA Cloning™ Kit für die Sequenzierung (-20 °C) • Ausreichend Reagenzien und One Shot™ TOP10 chemisch kompetente E. coli (bei -80 °C lagern) zur Klonierung von 10 GeneRacer™ PCR-Produkten; GeneRacer Modul (-20 °C), SuperScript III RT Modul (-20 °C), kompetente E. coli (bei -80 °C lagern), S.N.A.P. Säulen (Raumtemperatur), TOPO TA Klonierungskit für die Sequenzierung (-20 °C) |
| Format | Kit |
| Zur Verwendung mit (Anwendung) | Reverse Transkription |
| Enthält | GeneRacer Modul: 2 x 1, ml steriles Wasser, 24 μl RNaseOut, je 6 μl CIP (Calf-Intestinal-Phosphatase), CIP-Puffer, TAP (Tabak-Säure-Pyrophosphatase), 10x TAP-Puffer, T4-RNA-Ligase, 10x T4-RNA-Ligase-Puffer und 10 mM ATP, 6 x 250 ng GeneRacer RNA Oligo, 2 x 1 ml Phenol/Chloroform, 36 μl Muschelglykogen, 200 μl Natriumacetat (3 M), je 225 μl GeneRacer 5' Primer, 5' Nested-Primer, 3' Primer und 3' Nested-Primer, 20 μl Kontroll-RNA (HeLa Gesamt-RNA, 500 ng/μl), je 15 μl Kontroll-Primer A und Kontroll-Primer B.1; SuperScript III RT Modul: 6 μl SuperScript III Reverse Transkriptase (200 U/μl), 24 μl 5x Erststrang-Puffer, 15 μl DTT (0,1 M), 6 μl RNaseH (2 U/μl), 6 μl Random-Primer (100 ng/μl), 6 μl GeneRacer Oligo dT-Primer (900 ng/μl), 6 μl dNTP Mix (je 10 mM), 10 S.N.A.P. Säulen, TOPO TA Klonierungskit für die Sequenzierung (-20 °C), ausreichend Reagenzien und One Shot TOP10 chemisch kompetente E. coli |
| Produktlinie | GeneRacer, SuperScript, TA Cloning, TOPO |
| Produkttyp | Klonierungskit |
| Menge | 1 Kit |
| Vektor | pCR4-TOPO TA |
Nur für Forschungszwecke. Darf nicht für diagnostische Verfahren eingesetzt werden.
Indem Sie auf Absenden klicken, erklären Sie sich damit einverstanden, dass Fisher Scientific sich mit Ihnen in Verbindung setzen kann, um Ihr Feedback in diesem Formular zu bearbeiten. Wir werden Ihre Informationen nicht für andere Zwecke weitergeben. Alle bereitgestellten Kontaktinformationen werden in Übereinstimmung mit unserer Datenschutzrichtlinie aufbewahrt. Datenschutzrichtlinie.