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Invitrogen™ SuperScript™ III System für Erststrangsynthese
Beschreibung
Beinhaltet
Oligo(dT)20 (50 μM), 50 μl; Random-Hexamers (50 ng/μl), 250 μl; 10X RT-Puffer, 1 ml; 0,1 M DTT, 250 μl; 25 mM Magnesiumchlorid, 500 μl; 10 mM dNTP-Gemisch, 250 μl; SuperScript III RT (200 E/μl), 50 μl; RNaseOUT (40 E/μl), 100 μl; E. coli RNase H (2 E/μl) 50 μl; DEPC-behandeltes Wasser, 1,2 ml; Gesamt-HeLa RNA (10 ng/μl), 20 μl; Sense-Kontroll-Primer (10 μM), 25 μl; Antisense-Kontroll-Primer (10 μM), 25 μl
The SuperScript III First-Strand Synthesis System for RT-PCR is optimized to synthesize first-strand cDNA from purified poly(A)+ or total RNA. RNA targets from 100 bp to >12 kb can be detected with this system and the amount of starting material can vary from 1 pg to 5 μg of total RNA. SuperScript III Reverse Transcriptase is a version of M-MLV RT that has been engineered to reduce RNase H activity and provide increased thermal stability. The enzyme is used to synthesize cDNA at a temperature range of 42–55°C, providing increased specificity, higher yields of cDNA, and more full-length product than other reverse transcriptases. Because SuperScript III RT is not significantly inhibited by ribosomal and transfer RNA, it may be used to synthesize first-strand cDNA from a total RNA preparation.
Verwendung des Superscript™ III Erststrangsystems
Die cDNA-Synthese erfolgt im ersten Schritt entweder mit der Gesamt-RNA oder mit Poly(A)+-selektierter RNA, die an Oligo(dT), zufällige Primern oder einen genspezifischen Primer gebunden haben. Im zweiten Schritt wird die PCR in einem separaten Röhrchen mit den für das gewünschte Gen spezifischen Primern durchgeführt. Für die PCR-Reaktion empfehlen wir den Einsatz einer der folgenden DNA-Polymerasen: Platinum™ Taq DNA-Polymerase schafft automatische Hot-Start-Bedingungen mit höherer Spezifität bis zu 4 kb, Platinum™ Taq DNA-Polymerase bietet eine höhere Ausbeute und höchste Genauigkeit für Zielsequenzen bis zu 15 kb, und Platinum™ PfxDNA-Polymerase sorgt für höchste Genauigkeit für Zielsequenzen bis 12 kb.
Bestellinformation
Versandbedingung: Trockeneis
Spezifikation
Spezifikation
| Inhalt und Lagerung | Das SuperScript™ III Erststrang-Synthesesystem für RT-PCR wird geliefert mit: • Oligo(dT)20 (50 μM), 50 μl • Zufällige Hexamere (50 ng/μl), 250 μl • 10x RT-Puffer, 1 ml • 0,1 M DTT, 250 μl • 25 mM Magnesiumchlorid, 500 μl • 10 mM dNTP-Mix, 250 μl • SuperScript III RT (200 E/μl), 50 μl • RNaseOUT (40 E/μl), 100 μl • E. coli RNase H (2 E/μl), 50 μl • DEPC-behandeltes Wasser, 1,2 ml • HeLa-Gesamt-RNA (10 ng/μl), 20 μl • Sense Kontroll-Primer (10 μM), 25 μl • Antisense Kontroll-Primer (10 μM), 25 μl Ausreichend für 50 Reaktionen, auf Basis eines Reaktionsvolumens von 20 μl. Bei -20°C lagern. |
| Format | Kit |
| GC-Rich PCR Performance | Hoch |
| Reaktionsgeschwindigkeit | 50 min |
| Verfahren | Reverse Transkription |
| Optimale Reaktionstemperatur | 50 °C |
| Menge | 50 rxns |
| Reverse Transkriptase | SuperScript III |
| Versandbedingung | Trockeneis |
| Zur Verwendung mit (Anwendung) | Real-Time PCR (qPCR), RT-PCR |
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Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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