Invitrogen™ SuperScript™ III Reverse Transcriptase

• Thermostabilität: Halbwertszeit von 220 Minuten bei 50 °C
• Ausbeute: Reduzierte RNase H-Aktivität führt zu mehr Volllängen-cDNA
• Spezifität: volle Aktivität bei 50 °C gewährleistet erhöhte Spezifität mit genspezifischen Primern
• Anwendungen – Array-Kennzeichnung, cDNA-Bibliotheken, RT-PCR, Primer-Extension, 3'- und 5'-RACE
• Quelle: Aufgereinigt aus E. coli, das pol-Gen von M-MLV exprimiert und mutagenisiert; erhöht so die thermische Stabilität sowie die Halbwertszeit und reduziert die RNase H-Aktivität
• Leistungs- und Qualitätskontrolle: SDS-PAGE-Reinheitsgrad; Endodesoxyribonuklease-, Exodesoxyribonuklease- und Ribonuklease-Assays; sowie Ausbeute und Länge von cDNA
• Konzentration: 200 E/μl
• Einheitendefinition: Eine Einheit von SuperScript III RT ist die Menge an Enzym, die benötigt wird, um in 10 Minuten bei 37 °C mit Poly(A)·Oligo(dT)_12-18 als Template·Primer 1 nmol Desoxyribonukleotid in säurefällbares Material einzubinden
• Reaktionsbedingungen der Einheit: 50 mM Tris-HCl (pH 8,3), 40 mM KCl, 6 mM MgCl₂, 1 mM DTT, 0,5 mM [³H]dTTP, 0,1 mM Poly(A), 0,1 mM Oligo(dT)_12-18, 0,1 mg/ml BSA und Enzym in 50 μl für 10 Minuten bei 37 °C
• Optimale Reaktionstemperatur: 50 °C
• Endproduktgröße: 12,3 kb oder weniger

PCR und Real-Time PCR, reverse Transkription, Array-Markierung, cDNA-Bibliotheken, Primer-Verlängerung, 3'- und 5'-RACE