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Beschreibung
Maxima Reverse Transkriptase (RT) wurde durch In-vitro-Evolution von M-MuLV RT entwickelt. Das Enzym besitzt RNA- und DNA-abhängige Polymerase-Aktivität sowie RNase H-Aktivität. Das genetisch veränderte Enzym zeichnet sich im Vergleich zur Wildtyp M-MuLV RT durch eine wesentlich höhere Thermostabilität, Robustheit und cDNA-Syntheseraten aus.
Die Maxima Reverse Transkriptase ermöglicht reproduzierbare cDNA-Synthesen über einen großen Bereich von Gesamt-RNA-Mengen hinweg (von 1 pg bis 5 μg) und bei höheren Temperaturen (50 bis 65 °C) , was dieses Enzym zum idealen Hilfsmittel für zweistufige RT-qPCR macht (siehe unterstützende Daten).
Aufgrund seiner hohen Thermostabilität behält das Maxima-Enzym die volle Aktivität während der gesamten Reverse Transkriptionsreaktion bei, erzeugt die höchsten Erträge an cDNA und kann selbst sehr lange RNA-Transkripte bis 20 kb synthetisieren (siehe unterstützende Daten). Die Reaktionstemperatur kann zur effizienten Transkription von RNA-Bereichen mit einer hohen Sekundärstruktur oder zur Verbesserung der Spezifizität von genspezifischen Primern bis auf 65 °C erhöht werden. Aufgrund der erhöhten Syntheserate kann die reverse Transkriptionsreaktion in 15 bis 30 Minuten ausgeführt werden.
Thermo Scientific Maxima Umkehren Transcriptase (RT) wurde durch In-vitro -Evolution von M-MuLV RT entwickelt. Das Enzym besitzt RNA- und DNA-abhängige Polymerase-Aktivität sowie RNase H-Aktivität. Das gentechnisch veränderte Enzym zeichnet sich durch eine deutlich verbesserte Thermostabilität und Robustheit sowie erhöhte Syntheseraten im Vergleich zum Wildtyp M-MuLV RT aus.
Maxima Umkehren Transcriptase ist in der Lage, aus einem breiten Spektrum an eingesetzten Gesamt-RNA-Mengen (von 1 pg bis 5) reproduzierbare cDNA-Synthese durchzuführen.μg) bei erhöhten Temperaturen (–50 °65 C), was dieses Enzym zu einem idealen Werkzeug für die zweistufige RT-qPCR macht (siehe ergänzende Daten).
Aufgrund seiner hohen Thermostabilität Maxima Das Enzym behält seine volle Aktivität während der gesamten Reverse-Transkriptionsreaktion bei, erzeugt die höchsten cDNA-Ausbeuten und ist in der Lage, sogar sehr lange RNA-Transkripte bis zu 20 kb zu synthetisieren. Die Reaktionstemperatur kann auf bis zu 65 °C erhöht °werden, um eine effiziente Transkription von RNA-Regionen mit einer hohen Sekundärstruktur zu erreichen oder die Spezifität durch Verwendung genspezifischer Primer zu verbessern. Aufgrund der erhöhten Syntheserate kann die Reverse-Transkriptase-Reaktion in 15 bis 30 Minuten abgeschlossen
werden . Maxima Umkehren Transcriptase enthalten:
• Hohe Ausbeuten an cDNA in voller Länge bis zu 20 kb
• Aktiv bis 65 °C, °thermostabil,
•90 —% Aktivität nach 60-minütiger Inkubation bei 50 °C.
• Die hohe Sensitivität ermöglicht die reproduzierbare cDNA-Synthese aus einem breiten Spektrum an Gesamt-RNA-Mengen (1 pg bis 5 pg).μG)
• Effiziente Formel für die vollständige cDNA-Synthese in 15 bis 30 Minuten
• Enthält modifizierte Nukleotide.
Anwendungen: Zweistufige
•RT-PCR.
• Zweistufige RT-qPCR
• cDNA-Synthese des ersten Strangs
• Konstruktion von cDNA-Bibliotheken in voller Länge
• DNA-Markierung
• Primer-Verlängerung
ebenfalls erhältlich
• Maxima Umkehren Transcriptase (Kat.-Nr. EP0741)
• Maxima Kit zur Synthese von cDNA des ersten Strangs für RT-qPCR (Kat.-Nr. K1641)
• Maxima Kit zur Synthese von cDNA des ersten Strangs für RT-qPCR mit dsDNase (Kat.-Nr. K1671)
Spezifikation
Spezifikation
| Konzentration | 200 U/μl |
| Inhalt und Lagerung | 1 ml 5x RT-Puffer |
| Beschreibung | Mit 5x RT-Puffer (1 ml); 2000U (200U/μL) |
| Produktlinie | Maxima Umkehren Transcriptase |
| Menge | 2.000 Einheiten |
| Zur Verwendung mit (Anwendung) | RT-PCR, cDNA-Synthese |
| Aktivierungszeit | 90 % aktiv nach Inkubation bei 50 °C für 60 Minuten |
Nur für Forschungszwecke. Darf nicht für diagnostische Verfahren eingesetzt werden.
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