Macherey-Nagel™ MN-Rahmen für optimierte Handhabung von 96-Well-Platten

NucleoSpin 8/96 RNA zur automatisierten Aufreinigung von Gesamt-RNA aus tierischen oder menschlichen Zellkulturen und Gewebe kombiniert die Strenge der Guanidin-Isothiocyanat-Lyse mit der effektiven Verdauung genomischer DNA durch DNase-I-Behandlung und der Geschwindigkeit der Silicamembran-Technologie. NucleoSpin 8/96 RNA bedeutet gleichbleibende RNA-Qualität, reproduzierbare RNA-Ausbeuten und Hochdurchsatzverfahren ohne Kreuzkontamination. Daher sind NucleoSpin 8/96 RNA-Kits leistungsstarke Produkte, z. B. für die Microarray-Analyse im Hinblick auf Genexpressionsprofilierung, Wirkstoffforschung und molekulare Diagnostik (siehe Anwendungsdaten). Mit den Kits kann Gesamt-RNA aus bis zu 10 ⁷ Zellen oder bis zu 30 mg Gewebe (Zentrifugation) aufgereinigt werden. Das einzigartige Design der NucleoSpin 8/96 RNA-Systeme mit 8-Well-Streifen bzw. 96-Well-Platten ermöglicht das vollautomatische Trocknen des RNA-Bindungsmoduls vor dem Beladen mit Elutionspuffer und minimiert das Versprühen. Bei der NucleoSpin 8/96 RNA-Methode werden Zellen oder Gewebe durch Inkubation in einer Lösung, die große Mengen chaotroper Ionen enthält, lysiert (die Zellen können in 96-Well-Zellkulturplatten gezüchtet und direkt lysiert werden). Dieser Lysepuffer inaktiviert sofort RNasen und schafft geeignete Bindungsbedingungen, die die Adsorption von RNA an die Silicamembran des NucleoSpin 8 RNA-Bindungsstreifens/96 RNA-Bindungsplatte begünstigen. Kontaminierende DNA, die ebenfalls an die Silicamembran gebunden ist, wird durch DNase I entfernt, die während der Präparation direkt auf die Membran aufgetragen wird (DNase I ist im Kit enthalten). Aufgrund der hohen spezifischen Aktivität der DNase I genügt eine Behandlung von nur 15 Minuten bei Raumtemperatur für eine effiziente Entfernung kontaminierender DNA. Salze, Metaboliten und makromolekulare zelluläre Komponenten werden durch einfache Waschschritte mit drei verschiedenen Puffern entfernt. Reine RNA wird schließlich unter Bedingungen niedriger Ionenstärke mit RNase-freiem Wasser (pH 8,0 bis 8,5) eluiert.

Kit-Komponenten:
NucleoSpin 8 RNA-Kit – NucleoSpin RNA-Bindungsstreifen, MN-Waschplatten, MN-Quadratwellblöcke, Gestelle mit Röhrchenstreifen, Verschlussstreifen, Elutionsplatten mit U-Boden, selbsthaftende Folie, Puffer, RNase-freie DNase I. NucleoSpin 96 RNA-Kit – NucleoSpin RNA-Bindungsplatten, MN-Waschplatten, Quadratwellblöcke, Rundwellblock (niedrig), Elutionsplatten mit U-Boden, selbsthaftende Folie, Puffer, RNase-freie DNase I.

Manuelle oder automatisierte Isolierung von Gesamt-RNA aus kultivierten Zellen und Gewebe, Speichelproben, die mit Oragene Die