Invitrogen™ NovaBright™ Phospha-Light™ EXP Assay Kit for SEAP (Secreted Placental Alkaline Phosphatase) Reporter Gene Detection

Eine sensible Detektion des alkalischen Phosphatase-Reporterenzyms ermöglicht eine große Anzahl von Anwendungen in vielen Bereichen der biowissenschaftlichen Forschung, einschließlich Genexpression, viralen Funktionsassays, Impfstoffentwicklung, Entwicklung von Virusvektoren und Gentransfermethoden für die Gentherapie, In-vivo-Genexpressionsüberwachung und neuartigen zellulären Funktionsassays. Dieser SEAP-Assay ist eine der einfachsten und schnellsten Methoden zur Optimierung der Transfektionseffizienz. Dieser Assay wurde für eine Vielzahl von viralen, funktionellen Assays verwendet, darunter Assays für virale Genexpression, virale Replikation, virale Fusogenität, Virusneutralisierung und viral-vermittelte Zell-Zell-Fusion sowie virale Infektiosität. Die Verwendung des SEAP-Reporterproteins ist sehr gut für In-vivo-Reporter-Genassays geeignet, indem Serumproben von transgenen, transfizierten oder viralen vektorinfizierten Tieren getestet werden. Das NovaBright Reporter-Genassay-System wurde zur Messung der SEAP-Konzentrationen in Seren transgener oder transfizierter ganzer Tiere, einschließlich Maus-, Ratte-, Marmoset-, Affe- und Schweineseren sowie in Allantoisflüssigkeit von Hühnereiern verwendet. Das Maus-SEAP-Protein (mSEAP) wurde kürzlich für eine verbesserte SEAP-Proteinstabilität bei transgenen Mäusen entwickelt, und der NovaBright SEAP-Assay wurde für die sensible Detektion von mSEAP verwendet. Neben Reporter-Gen-Anwendungen (Genexpression) dient das Assay-System zur Messung von SEAP als funktionaler Reporter für Ligand-Rezeptorbindung-Assays mit SEAP-Ligand-Chimäre, Protease-vermittelter Sekretion und für Sekretionswegaktivität. Das NovaBright Assay-System kann für die zelluläre Messung von nicht plazentarer alkalischer Phosphatase als Biomarker verwendet werden.

Dieses Kit bietet ein viel einfacheres Verfahren als andere Assays. Der Assay ist homogen und erfordert nur zwei Lösungen, die gebrauchsfertig geliefert werden. Die verlängerte Kinetik der Glimmlichtemission führt zu einem stabilen Lichtsignal und dadurch zu einer flexiblen Ablesezeit. Das Assay-Signal wird in einem einfachen Luminometer ohne Injektoren gemessen. SEAP ist ein Reporterprotein, das in das Zellkulturmedium abgesondert und durch die Prüfung der Aliquoten des Mediums nachgewiesen wird. Da SEAP in das Medium freigesetzt wird, ist eine Zelllyse unnötig. Der Assay ermöglicht jedoch auch den Nachweis von Isoenzymen von plazentaren alkalischen Phosphasen (PLAP) nach der Zelllyse.

• Chemoillumineszentes Reporter-Gen-Assay der zweiten Generation
• Einfaches, schnelles Protokoll, kompatibel mit hohem Durchsatz
• Hochsensible Detektion von sezernierter, plazentarer alkalischer Phosphatase
• Kompatibilität mit automatisierten Plattformen mit bereits vorhandenen Triggerlösungen/Positionen

• Nachweisverfahren. Chemolumineszenz
• Zur Verwendung mit (Geräte): Luminometer (Mikrotiterplatte)
• Format: 96-Well-Platte
• Mit hohem Durchsatz kompatibel: Hochdurchsatzkompatibel
• Anzeige: Endpunkt
• Substrat: CSPD
• Substrateigenschaften: Chemisches Substrat
• Substrattyp: AP-Substrat (alkalische Phosphatase)
• Zielenzym: Plazentare alkalische Phosphatase