Invitrogen™ IgG-Subklassen Human ELISA-Kit

Beschreibung

Der Human-IgG-Subklasse-Profil (Hu-IgG)-ELISA quantifiziert Hu-IgG-Subklassen in humanem Serum oder Zellkulturmedium. Der Assay erkennt ausschließlich natürliches und rekombinantes Hu-IgG1, IgG2, IgG3 oder IgG4.

Prinzip der Methode

Der Human IL-10-Festphasen-Sandwich-ELISA (Enzym-verbundener Immunosorbent-Assay) misst die Menge des Zieles, das zwischen einem zusammenpassenden Antikörperpaar gebunden ist. Ein zielspezifischer Antikörper wurde in den Wells der mitgelieferten Mikrotiterplatte vorbeschichtet. Proben, Standards oder Kontrollen werden dann in diese Wells gegeben und binden an den immobilisierten Antikörper (Capture). Das Sandwich wird durch den Zusatz des zweiten Antikörpers (Detektor) gebildet, der an ein anderes Epitop des Capture-Antikörpers gebunden ist. Ein konjugiertes Enzym wurde in den Assay integriert. Nach Inkubations- und Waschschritten zur Säuberung der Mikrotiterplatte von ungebundenen Substanzen wird eine Substratlösung hinzugefügt, die mit dem Enzym-Antikörper-Zielkomplex reagiert, um ein messbares Signal zu erzeugen. Die Intensität dieses Signals ist direkt proportional zur Konzentration des in der Originalprobe vorhandenen Ziels.

Strenge Validierung

Jede hergestellte Charge dieses ELISA-Kits ist auf Kriterien wie Empfindlichkeit, Spezifität, Präzision und Chargenkonsistenz geprüft. Weitere Informationen zur Validierung werden in der Bedienungsanleitung angegeben.

Der Isotyp eines primären Antikörpers und die Anwendung, in der er eingesetzt wird, können zu einer Hintergrundfärbung führen. Primärantikörper-Hintergrundrauschen kann durch Bindung an Fc-Rezeptoren in Zielzellen, durch unspezifische Interaktionen mit zellulären Proteinen, Kohlenhydraten und Lipiden oder durch Zellautofluoreszenz verursacht werden. Isotyp-Kontrollantikörper können als Negativkontrollen dienen, um nicht-spezifische Hintergrundsignale von spezifischen Antikörpersignalen zu unterscheiden, da sie keine relevante Spezifität zu einem Zielantigen haben. Auch wenn Isotypkontrollen am häufigsten in der Durchflusszytometrie eingesetzt werden, sind sie auch in anderen Anwendungen wie der Chromatin-Immunpräzipitation (ChIP), der Immunhistochemie und Gelverschiebungen nützlich. Die Isotypkontrollen sollten mit der Spezies und dem Isotyp des primären Antikörpers übereinstimmen, damit der Grad der spezifischen Färbung durch den primären Antikörper genau bestimmt werden kann. Wenn direkt markierte primäre Antikörper verwendet werden, funktioniert die Isotypkontrolle am besten, wenn sie mit demselben Marker wie der Testantikörper konjugiert wird.

Bestellinformation

Versandbedingung: Nasses Eis