Invitrogen™ Novex™ TNF-α Human ELISA-Kit

Beschreibung

Der Human-Tumor-Nekrose-Faktor alpha (Hu TNF-α) ELISA quantifiziert Hu TNF-α in Humanserum, -plasma, gepufferter Lösung oder Zellkulturmedium.Der Assay erkennt ausschließlich natürlichen und rekombinanten Hu-TNFα.Funktionsprinzip der Methode Der Human-TNFα Festphasen-Sandwich-ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) misst die zwischen einem zusammenpassenden Antikörperpaar gebundene Zielmenge.Ein zielspezifischer Antikörper wurde in den Wells der mitgelieferten Mikrotiterplatte vorbeschichtet.Proben, Standards oder Kontrollen werden dann in diese Wells gegeben und binden an den immobilisierten Antikörper (Capture).Das Sandwich entsteht durch Zugabe des zweiten Antikörpers (Detektor), dann wird eine Substratlösung hinzugefügt, die mit dem Enzym-Antikörper-Zielkomplex reagiert und ein messbares Signal erzeugt.Die Intensität dieses Signals ist direkt proportional zur Konzentration des in der Originalprobe vorhandenen Ziels.Strenge Validierung Jede hergestellte Charge dieses ELISA-Kits ist auf Kriterien wie Empfindlichkeit, Spezifität, Präzision und Chargenkonsistenz geprüft.Weitere Informationen zur Validierung werden in der Bedienungsanleitung angegeben.

Das Testkit wurde ausschließlich für Forschungszwecke entwickelt, um den Gehalt an humanem TNF-α in Serum, Plasma und Überstand mit 96-Well-Platten und einem Mikrotiterplatten-Reader zu ermitteln und zu quantifizieren.

Einfach zu handhabender Sandwich-ELISA
Ein monoklonaler, für humane TNFα spezifischer Capture-Antikörper wurde maschinell auf die Wells der 96-Well-Platte beschichtet, wodurch eine geringe Variabilität zwischen den Wells gewährleistet wird und die Notwendigkeit einer Beschichtung über Nacht entfällt. In diese Wells wurden Proben pipettiert, einschließlich eines Standards bekannter humaner TNF-α-Inhalte, Kontrollen und Unbekannten. Während der ersten Inkubation bindet das humane TNF-α-Antigen an eine Stelle den immobilisierten Capture-Antikörper. Nach dem Waschen wird ein biotinylierter monoklonaler Antikörper hinzugefügt, der spezifisch für humane TNF-α ist. Während der zweiten Inkubation bindet dieser Antikörper an eine andere Stelle des immobilisierten humanen TNF-α-Antigens. Nach dem Waschen wird eine Streptavidin-Meerrettichperoxidase (HRP) hinzugefügt. Diese bindet an den biotinylierten Nachweisantikörper, um die vier Teile des Sandwichs zu vervollständigen. Nach einer zweiten Inkubation und Waschung, bei der alle ungebundenen Enzymen entfernt werden, wird eine Substratlösung (TMB) hinzugefügt, die vom gebundenen Enzym zur Erzeugung einer Farbe genutzt wird. Die Intensität der Färbung ist direkt proportional zur Konzentration humaner TNF-α-Konzentrationen in der Originalprobe, und die optische Dichte kann auf einem standardmäßigen Mikrotiterplatten-Lesegerät abgelesen werden. Die Inkubationszeit des Assays beträgt insgesamt nur vier Stunden.

• Anwenderfreundlich
• Schnelles Protokoll
• Praktische vorbeschichtete 96-Well-Platte mit herausnehmbaren 8-Well-Streifen für kleinere Probenläufe

Weitere Informationen zur Validierung werden auf der Protokollbeilage angegeben.

Apoptose, Apoptose-bezogene Faktoren, Zellanalyse, Zellsignalweiterleitung, Zellviabilität, Zellproliferation und -funktion, Immunoassays, gebrauchsfertiger Immunoassay

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