Macherey-Nagel™ NucleoSpin™ RNA-Midi-Kit zur RNA-Reinigung

NucleoSpin™ RNA L ermöglicht die Isolierung von DNA-free Hochwertige RNA aus großen Mengen an Ausgangsmaterial, z. B. aus Zellkulturen, Gewebe, Bakterien und Hefen. Zellen werden durch Inkubation in einer Lösung mit einer großen Menge an chaotropen Ionen lysiert. Dieser Lysepuffer inaktiviert RNasen sofort, was geeignete Bindungsbedingungen schafft, die die Adsorption von RNA an die Silikamembran begünstigen. Nach der Lyse werden Homogenisierung und Viskositätsreduzierung durch Filtration mit NucleoSpin™ Filter L-Einheiten. An die Silikamembran gebundene kontaminierende DNA wird durch eine DNase I-Lösung beseitigt, die während der Vorbereitung direkt auf die Silikamembran aufgebracht wird. Optimale Bedingungen für die DNase werden erreicht, indem die Silikamembran vor der Behandlung mit einem spezifischen Entsalzungspuffer gewaschen wird. Salze, Metaboliten und makromolekulare zelluläre Komponenten werden durch einfache Waschschritte mit zwei verschiedenen Puffern entfernt. Die Gesamt-RNA wird schließlich mit RNase-freiem Wasser eluiert. Kit-Komponenten: NucleoSpin™ RNA-L-Säulen mit 15-ml-Sammelröhrchen und 15-ml-Elutionsröhrchen, NucleoSpin™ Filter L, Puffer, RNase-freie DNase I, DNase I-Reaktionspuffer, RNase-freies Wasser.

• DNase I wurde zur Entfernung genomischer DNA hinzugefügt. NucleoSpin™ Filter zur Homogenisierung und Reduzierung der Lysatviskosität
• Silika-Membran-Technologie
• Ausbeute: 180 μg ( ^10⁷ HeLa-Zellen), 620 μg (4 x ^10⁷ HeLa-Zellen)
• Probenmaterial: < 5 x ^10⁷ kultivierte Zellen, < 10 ¹⁰ Bakterienzellen, ≤ 3 x 10 ⁸ Hefezellen, < 200 mg Gewebe
• Typischer RIN: > 9
• Elutionsvolumen: 500 μl
• Bindekapazität: 700 μg
• Zubereitungszeit: 80 Min. / 4 Portionen
• Format: Midi-Spin-Säule. Isolierung von Gesamt-RNA aus kultivierten Zellen, Gewebe, Bakterien, Hefen und in Proben gelagerten Proben. RNAlater und RNA-Reinigung von Reaktionsmischungen.