Macherey-Nagel™ NucleoSpin RNA L (20) 20 preps for the isolation of RNA from cells and tissue Buffer

NucleoSpin™ RNA L ermöglicht die Isolierung von DNA-freier, hochwertiger RNA aus großen Mengen an Ausgangsmaterial, z. B. kultivierten Zellen, Gewebe, Bakterien und Hefen. Zellen werden durch Inkubation in einer Lösung mit einer großen Menge an chaotropen Ionen lysiert. Dieser Lysepuffer inaktiviert RNasen sofort, was geeignete Bindungsbedingungen schafft, die die Adsorption von RNA an die Silikamembran begünstigen. Nach der Lyse werden Homogenisierung und Viskositätsreduktion durch Filtration mit NucleoSpin™ L-Filtereinheiten erreicht. An die Silikamembran gebundene kontaminierende DNA wird durch eine DNase I-Lösung beseitigt, die während der Vorbereitung direkt auf die Silikamembran aufgebracht wird. Optimale Bedingungen für die DNase werden erreicht, indem die Silikamembran vor der Behandlung mit einem spezifischen Entsalzungspuffer gewaschen wird. Salze, Metaboliten und makromolekulare zelluläre Komponenten werden durch einfache Waschschritte mit zwei verschiedenen Puffern entfernt. Die Gesamt-RNA wird schließlich mit RNase-freiem Wasser eluiert. Inhalt des Kits: NucleoSpin™ RNA L-Säulen mit 15 ml-Entnahmeröhrchen, 15 ml-Elutionsröhrchen, NucleoSpin™ L-Filter, Puffer, RNase-freie DNase I, DNase I-Reaktionspuffer, RNase-freies Wasser.

• DNase I ist für die Entfernung genomischer DNA und NucleoSpin™ Filter zur Homogenisierung und Reduzierung der Lysatviskosität enthalten
• Silika-Membran-Technologie
• Ertrag: 180 μg (10⁷ HeLa-Zellen), 620 μg (4 x 10⁷ HeLa-Zellen)
• Probenmaterial: <5 x 10⁷ cultured cells, <10¹⁰ bacterial cells, ≤3 x 10⁸ yeast cells, <200mg tissue
• Typical RIN: >9
• Elutionsvolumen: 500 μ l
• Bindungsvermögen: 700 μ g
• Vorbereitungszeit: 80min/4 Preps
• Format: Isolierung der Gesamt-RNA mittels Midi-Spin-Säule aus kultivierten Zellen, Gewebe, Bakterien, Hefen, Proben, die in RNAlater aufbewahrt werden und RNA-Aufreinigung von Reaktionsmischungen.