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Beschreibung
Thermo Scientific™ phi29 DNA-Polymerase ist eine äußerst prozessive Polymerase (bis zu mehr als 70 kb) mit starker Strangverdrängungsaktivität, die eine hocheffiziente isothermische DNA-Amplifikation ermöglicht. phi29 DNA-Polymerase besitzt außerdem eine 3'→5' Exonuklease- (Proofreading-) Aktivität, die vorzugsweise auf einsträngiger DNA oder RNA wirkt. Daher sind 3'-modifizierte Primer sehr gut geeignet.
Highlights
• Höchste Prozessivität und Strangverdrängungsaktivität unter bekannten DNA-Polymerasen – über 70 kb lange DNA-Strecken können synthetisiert
• werden Hochgenaue DNA-Synthese
• Extrem hohe Ausbeuten amplifizierter DNA selbst aus winzigen Mengen von Template
• Amplifikationsprodukten können direkt in nachgelagerten Anwendungen (PCR, Restriktionsverdau, SNP-Genotypisierung usw.)
Anwendungen
• Walzkreisamplifikation (RCA): Erzeugung periodischer DNA-Nanorotemplatten
• Mehrfachverdrängungsamplifikation (MDA)
• Unvoreingenommene Amplifikation des gesamten Genoms (WGA, siehe Abbildung 1 unter “Unterstützende Daten”):
• Amplifikation von DNA für SNP- und STR-Nachweiszellfreie
• Amplifikation von DNA aus Einzelzellen
• pathogene Organismen oder Metagenomen-Amplifikation
• von DNA aus Filterpapier Blutfleckproben
• DNA-Template-Vorbereitung für die Sequenzierung
• Protein-grundierte DNA-Amplifikation
• In-situ-Genotypisierung mit Vorhängeschlosssonden
Rekombinationsbasiertes Klonen
• Zellfreies Klonen von letalem DNA
• -RNA-primed DNA-Amplifikation
Hinweis
Die Zugabe von Pyrophosphatase in das Reaktionsgemisch mit Phi29 DNA-Polymerase kann die DNA-Synthese verbessern.
Die Verwendung dieses Enzyms in bestimmten Anwendungen kann durch Patente abgedeckt werden und erfordert möglicherweise eine Lizenz.
Spezifikation
Spezifikation
| Produkttyp | Stand-alone enzyme |
| Zur Verwendung mit (Anwendung) | MDA-WGA, RCA |
| Polymerase | phi29 DNA Polymerase |
| Menge | 2,5 μg (250 U) |
| Inhalt und Lagerung | • phi29 DNA Polymerase (250 units at 10 U/μL) • 10X Reaction Buffer for phi29 DNA Polymerase • Store at –15 to –25°C. |
| Optimale Reaktionstemperatur | 30°C |
| Versandbedingung | Trockeneis |
| Konzentration | 10 U/μL |
| Reaktionszeit | 4 hours |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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