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Beschreibung
Thermo Scientific™ phi29 DNA-Polymerase ist eine äußerst prozessive Polymerase (bis zu mehr als 70 kb) mit starker Strangverdrängungsaktivität, die eine hocheffiziente isothermische DNA-Amplifikation ermöglicht. phi29 DNA-Polymerase besitzt außerdem eine 3'→5' Exonuklease- (Proofreading-) Aktivität, die vorzugsweise auf einsträngiger DNA oder RNA wirkt. Daher sind 3'-modifizierte Primer sehr gut geeignet.
Besonderheiten
• Höchste Prozessivität und Strang-Verdrängungsaktivität unter bekannten DNA-Polymerasen – Mehr als 70 kb lange DNA-Abschnitte können synthetisiert werden
• Hochgenaue DNA-Synthese
• Extrem hohe Ausbeute an amplifizierter DNA, selbst aus winzigen Mengen von Ausgangsmaterial
• Amplifikationsprodukte können direkt in Downstream-Prozessen (PCR, Restriktionsverdau, SNP-Genotypisierung usw.) verwendet werden
Anwendungen
• Rolling Circle Amplification (RCA): Erzeugung periodischer DNA-Nano-Templates
• Multiple Displacement Amplification (MDA)
• Unverzerrte Genomamplifikation (WGA, siehe Abbildung 1 unter „Unterstützende Daten“):
• Amplifikation von DNA für SNP- und STR-Nachweis
• Zellfreie Amplifikation von DNA aus Einzelzellen
• Pathogene Organismen oder Metagenome
• Amplifikation von DNA aus Filterpapier-Blutproben
• DNA-Template-Vorbereitung für die Sequenzierung
• Protein-grundierte DNA-Amplifikation
• In-situ-Genotypisierung mit verschlossenen Proben
• Rekombinationsbasiertes Klonieren
• Zellfreies Klonieren von letalem DNA
• RNA-grundierte DNA-Amplifikation
Hinweis
Die Zugabe von Pyrophosphatase in das Reaktionsgemisch mit EquiPhi29 DNA-Polymerase kann die DNA-Synthese weiter verbessern.
Die Verwendung dieses Enzyms in bestimmten Applikationen ist möglicherweise patentrechtlich geschützt und erfordert u. U. eine Lizenz.
Spécification
Spécification
| Produkttyp | Stand-alone enzyme |
| Zur Verwendung mit (Anwendung) | MDA-WGA, RCA |
| Polymerase | phi29 DNA Polymerase |
| Menge | 10 μg (1000 U) |
| Inhalt und Lagerung | • phi29 DNA Polymerase (1,000 units at 10 U/μL) • 10X Reaction Buffer for phi29 DNA Polymerase • Store at –15 to –25°C. |
| Optimale Reaktionstemperatur | 30°C |
| Versandbedingung | Trockeneis |
| Konzentration | 10 U/μL |
| Reaktionszeit | 4 hours |
Nur für Forschungszwecke. Nicht zur Verwendung bei diagnostischen Verfahren.
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