Thermo Scientific™ Phusion™ Plus DNA Polymerase

Thermo Scientific Phusion Plus DNA-Polymerase ist eine hochgenaue Hot-Start-DNA-Polymerase, die Proteinfusionstechnologie und universelles Primer-Annealing vereint. Es handelt sich um eine Pyrococcus-ähnliche Proofreading-DNA-Polymerase, die zu einer prozessivitätsverbesserenden Domäne fusioniert ist und es der Phusion Plus DNA-Polymerase ermöglicht, PCR-Sequenzen mit hoher Genauigkeit, Empfindlichkeit und Inhibitor-Toleranz zu erzeugen.

• Hohe Treue — bietet >100-fach höhere Sequenzgenauigkeit als Taq Polymerase
• Komfortable Einrichtung — ermöglicht eine universelle Annealing-Temperatur von 60 °C in der PCR
• Verbesserte Spezifizität — Hot-Start-Mechanismus reduziert unspezifische Amplifikation und Primer-Abbau
• Stabilität — Automatisierung ermöglicht durch 24-Stunden-Stabilität der montierten Reaktionen
• Hohe Inhibitor-Toleranz — Arbeitet auch mit DNA von suboptimaler Reinheit

Der neuartige Phusion Plus Reaktionspuffer enthält proprietäre Additive, die Primer/Template-Duplexe während des Annealing-Schritts bei 60 °C stabilisieren Diese einzigartige Pufferformulierung erhöht die PCR-Spezifität, ohne dass die Annealing-Temperatur für jedes Primer-Paar optimiert werden muss. Dadurch sparen Sie Zeit und vermeiden Fehler in PCR-Durchläufen. Darüber hinaus können mit Phusion Plus DNA-Polymerase und seiner universellen Annealing-Funktion verschiedene PCR-Reaktionen mit demselben Protokoll zusammen durchgeführt werden.

Phusion Plus DNA-Polymerase ist bei Umgebungstemperaturen aufgrund seines Hot-Start-Mechanismus, der durch Affibody-Moleküle vermittelt wird, inaktiv und ermöglicht die Einrichtung und Lagerung von montierten PCR-Reaktionen bei Raumtemperatur. Die Enzymaktivität wird nach dem ersten Denaturierungsschritt vollständig wiederhergestellt.

Anwendungen
• High-Fidelity-PCR
• Klonen
• Template-Erstellung für die Sequenzierung
• GC-reiche PCR
• Long-Range-PCR (bis zu 20 kb)
• Mutagenese
• Hochdurchsatz-PCR

Um die Einrichtung von PCR-Reaktionen zu vereinfachen, ist Phusion Plus DNA Polymerase auch in gebrauchsfertigen Mastermix-Formaten erhältlich. Phusion Plus PCR Master Mix (Kat.- Nr. F631S) ist eine praktische 2X-Mischung aus Enzym, Reaktionspuffer, Magnesiumchlorid und dNTPs. Der PCR-Reaktion müssen lediglich das Template und die Primer zugegeben werden. Phusion Plus Green PCR Master Mix (F632S) enthält zusätzlich ein Dichtereagenz und zwei Tracking-Farbstoffe für das direkte Laden von PCR-Produkten auf Gele.