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Beschreibung
Thermo Scientific Phusion Plus DNA Polymerase is a hot-start, high-fidelity DNA polymerase that brings together protein fusion technology and universal primer annealing. It is a Pyrococcus-like proofreading DNA polymerase fused to a processivity-enhancing domain, enabling Phusion Plus DNA Polymerase to generate PCR sequences with high accuracy, sensitivity, and inhibitor tolerance.
Die Phusion Plus DNA-Polymerase von Thermo Scientific ist eine Pyrococcus-ähnliche Proofreading-DNA-Polymerase, die zu einer prozessivitätsverbessernden Domäne fusioniert ist und es der Phusion Plus DNA-Polymerase ermöglicht, PCR-Sequenzen mit hoher Genauigkeit, Sensitivität und Inhibitor-Toleranz zu erzeugen.
- Hohe Genauigkeit:: für >100-mal höhere Sequenzgenauigkeit als Taq-Polymerase
- Praktischer Aufbau: ermöglicht eine universelle Annealing-Temperatur von 60 °C bei der PCR
- Erhöhte Spezifität: Hot-Start-Mechanismus reduziert die unspezifische Amplifikation und Primer-Degradation
- Arbeitsstabilität: automatisierungsfähig dank der 24-Stunden-Stabilität zusammengesetzter Reaktionen
- Hohe Inhibitor-Toleranz: funktioniert mit DNA von suboptimalem Reinheitsgrad
Der neuartige Phusion Plus Reaktionspuffer enthält urheberrechtlich geschützte Additive, die Primer/Template-Duplexe während des Annealing-Schritts bei 60 °C stabilisieren. Diese einzigartige Pufferformulierung erhöht die PCR-Spezifität, ohne dass die Glühtemperatur für jedes Primer-Paar optimiert werden muss. Dadurch sparen Sie Zeit und vermeiden Fehler in PCR-Durchläufen. Darüber hinaus können mit Phusion Plus DNA-Polymerase und der universellen Annealing-Funktion verschiedene PCR-Reaktionen im selben Zyklus mit demselben Protokoll verarbeitet werden.
Phusion Plus DNA-Polymerase ist aufgrund seines Hot-Start-Mechanismus, der durch Affibody-Moleküle vermittelt wird, bei Umgebungstemperaturen inaktiv und ermöglicht damit die Einrichtung und Lagerung von zusammengesetzten PCR-Reaktionen bei Raumtemperatur. Die Enzymaktivität wird nach dem ersten Denaturierungsschritt vollständig wiederhergestellt.
Anwendungen
- PCR mit hoher Wiedergabetreue
- Klonierung
- Template-Generierung für die Sequenzierung
- GC-reiche PCR
- Long-Range-PCR (bis zu 20 kb)
- Mutagenese
- PCR mit hohem Durchsatz
Um die Einrichtung der PCR-Reaktion zu vereinfachen, ist Phusion Plus DNA-Polymerase auch in gebrauchsfertigen Master-Mix-Formaten erhältlich. Phusion Plus PCR Master Mix ist eine praktische 2X-Mischung aus Enzym, Reaktionspuffer, Magnesiumchlorid und dNTPs. Lediglich das Template und die Primer müssen zur PCR-Reaktion hinzugefügt werden. Phusion Plus Green PCR Master Mix enthält zusätzlich ein Dichtereagenz und zwei Tracking-Farbstoffe für das direkte Laden von PCR-Produkten auf Gele.
Spezifikation
Spezifikation
| Inhalt und Lagerung | •Phusion Plus DNA-Polymerase, 50 µl •5x Phusion Plus Puffer, 1,25 ml •5x Phusion GC Enhancer, 1,25 ml Lagerung bei -25 °C bis -15 °C |
| GC-Rich PCR Performance | Hoch |
| Polymerase | Phusion Plus DNA-Polymerase |
| Reaktionsgeschwindigkeit | 15 bis 30 s/kb |
| Menge | 100 x 50 μL reactions |
| Versandbedingung | Room Temp or Wet Ice |
| Zur Verwendung mit (Anwendung) | Heißstart-PCR, PCR mit hoher Wiedergabetreue |
| Wiedergabetreue (vs. Taq) | >100X |
| Hot-Start | Integrierter Heißstart |
| Anzahl Reaktionen | 100 Reaktionen |
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For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
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